Anticorpo Policlonale Anti-EIF5A2 per WB, ELISA - Q9GZV4

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di EIF5A2

• Codifica per il fattore di iniziazione eucariotico della traduzione 5A-2 (eIF5A2), una proteina altamente conservata che facilita l'elongazione e la terminazione della traduzione, in particolare sui ribosomi bloccati su motivi poliprolina e altre sequenze problematiche. Riferimenti correlati: PMID:14622290
• Agisce come cofattore del controllo di qualità del ribosoma (RQC), assistendo nel trasferimento peptidilico durante la formazione della coda CAT sui ribosomi bloccati, e partecipa anche al decadimento dell'mRNA e alle vie di integrità della parete cellulare in risposta allo stress (Per somiglianza).
• La famiglia eIF5A include due isoforme nell'uomo: EIF5A1 (espressa costitutivamente) e EIF5A2 (spesso sovraespressa nei tumori), entrambe richiedenti l'ipusinazione post-traduzionale per l'attività.
• La localizzazione subcellulare comprende il citoplasma, il nucleo e la membrana del reticolo endoplasmatico, coerente con i suoi ruoli nella traduzione, nell'esporto nucleare degli mRNA e nei processi co-traduzionali.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono la formazione di ipusina (essenziale per l'attività) e l'acetilazione, con un'ulteriore capacità di legare l'RNA; la proteina matura è di circa 17 kDa.
• L'analisi dell'espressione tissutale mostra alti livelli nel testicolo, mentre la sovraespressione è stata documentata in linee cellulari di cancro ovarico, colorettale e altri, correlata a una prognosi sfavorevole.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla proteina a lunghezza intera (aa 1-153), coprendo il dominio N-terminale critico per il legame al ribosoma e l'ipusinazione; questo design supporta il rilevamento sia delle forme precursore che mature nei gel denaturanti.
• Per il western blot, considerare di eseguire lisati cellulari totali o di tessuto in condizioni riducenti; EIF5A2 migra vicino a 17 kDa, e si consigliano controlli di caricamento intorno a 15–20 kDa.
• Validare la reattività nel proprio sistema campione: si prevede che questo anticorpo reagisca in modo incrociato con EIF5A2 umano, di topo e di ratto, ma l'espressione endogena può variare; confermare con controlli positivi e negativi.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'uso di EIF5A2 ricombinante purificata come standard e della titolazione delle concentrazioni di anticorpo per ottimizzare i rapporti segnale-rumore.

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