Anticorpo Policlonale Anti-EIF5B per WB, IF/ICC, ELISA - O60841

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di EIF5B

• EIF5B (fattore di inizio della traduzione eucariotico 5B), noto anche come IF2, è una proteina legante il GTP di ~139 kDa appartenente alla famiglia dei fattori di inizio della traduzione.
• Agisce come una GTPasi ribosoma-dipendente, promuovendo la giunzione della subunità ribosomiale 60S al complesso di pre-inizio per formare il complesso di inizio 80S. Riferimenti correlati: PMID:10659855 PMID:35732735
• Insieme a eIF1A (EIF1AX), orienta l'RNAt metionina iniziatore in una conformazione che permette la giunzione della subunità 60S. Riferimenti correlati: PMID:12569173 PMID:35732735
• L'idrolisi del GTP è essenziale per l'espulsione di eIF1A e il successivo rilascio di EIF5B, consentendo la formazione di ribosomi competenti per l'elongazione. Riferimenti correlati: PMID:10659855 PMID:35732735
• EIF5B è localizzato nel citoplasma.
• È una fosfoproteina e una proteina legante metalli con ruoli critici nella biosintesi proteica.
• A differenza del suo omologo procariotico, EIF5B non promuove il reclutamento del Met-tRNA alla piccola subunità ribosomiale. Riferimenti correlati: PMID:10659855

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–273) dell'EIF5B umano. Considerare che l'anticorpo può riconoscere l'EIF5B a lunghezza intera e possibilmente frammenti o isoforme N-terminali.
• Per il Western blotting (WB), utilizzare controlli positivi appropriati (es. HeLa, HEK293 o altre linee cellulari che esprimono EIF5B) e validare la specificità della banda con marcatori di peso molecolare (atteso ~139 kDa). Regolare la diluizione dell'anticorpo primario in base a esperimenti di titolazione iniziali.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), includere passaggi di permeabilizzazione e considerare la co-colorazione con marcatori di organelli per confermare la localizzazione citoplasmatica.
• Per l'ELISA, ottimizzare l'antigene di ricoprimento e le condizioni di rilevamento; l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rivelazione a seconda del formato del saggio.

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