Anticorpo monoclonale coniglio anti-EMC4 per WB, IHC-P, ELISA - Q5J8M3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EMC4

• EMC4, noto anche come PIG17 o TMEM85, è una subunità del complesso proteico di membrana del reticolo endoplasmatico (EMC), un insertasi multiproteico che facilita la biogenesi delle proteine di membrana.
• L'EMC media l'inserimento indipendente dall'energia delle proteine di membrana appena sintetizzate nella membrana del RE, con una preferenza per i substrati che contengono domini transmembrana debolmente idrofobi o destabilizzanti. Riferimenti correlati: PMID:29242231, PMID:29809151, PMID:30415835
• È essenziale per l'inserimento cotraduzionale delle proteine di membrana a più passaggi, garantendo una corretta integrazione della sequenza di ancoraggio della membrana di stop-transfer nelle membrane del RE. Riferimenti correlati: PMID:29809151, PMID:30415835
• Inoltre, EMC4 è richiesto per l'inserimento post-traduzionale delle proteine con coda ancorata (TA) nella membrana del RE. Riferimenti correlati: PMID:29242231, PMID:29809151
• Mediando il corretto inserimento cotraduzionale dei domini transmembrana N-terminali in una topologia N-exo, l'EMC controlla l'orientamento topologico delle proteine di membrana a più passaggi, come i recettori accoppiati a proteine G (GPCR). Riferimenti correlati: PMID:30415835
• EMC4 si localizza alla membrana del reticolo endoplasmatico. Lo splicing alternativo genera isoforme con un'espressione tissutale distinta: l'isoforma 1 è espressa nel cervello e nel cuore, mentre l'isoforma 2 è espressa nel cuore.
• La proteina è soggetta ad acetilazione e fosforilazione ed è stata identificata in analisi proteomiche; è annotata con parole chiave che includono splicing alternativo, apoptosi e domini transmembrana.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Design dell'immunogeno: L'immunogeno ricombinante copre gli amminoacidi 1–100 di EMC4 umano (regione N-terminale). Si consiglia di verificare la reattività dell'anticorpo contro la proteina endogena a lunghezza intera, poiché questa regione può includere sia elementi strutturati che disordinati.
• Western blot: L'anticorpo rileva bande intorno a 15 kDa, 16 kDa e 20 kDa, probabilmente riflettendo modificazioni post-traduzionali o differenze isoformali. Convalidare questi modelli nel vostro specifico sistema campione.
• IHC-P: Le condizioni di recupero dell'antigene e di rilevamento dovrebbero essere ottimizzate per ogni tipo di tessuto. Nessun protocollo singolo è universalmente applicabile; si raccomandano studi pilota.
• ELISA: Adatto per formati di saggio standard; tuttavia, le condizioni di rivestimento e gli intervalli di rilevamento devono essere determinati empiricamente.
• Reattività crociata: L'anticorpo cross-reagisce con EMC4 di topo e ratto, ma le diluizioni di lavoro ottimali possono variare tra le specie. Si consiglia la titolazione.
• Nota generale: Tutti gli esperimenti dovrebbero includere appropriati controlli positivi e negativi per confermare la specificità.

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