Anticorpo monoclonale coniglio anti-Endo G per WB, ELISA - Q14249

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Endo G

• Endo G è un'endonucleasi mitocondriale codificata dal gene ENDOG, localizzata principalmente nel mitocondrio (LOCALIZZAZIONE SULLOTTOCELLULARE: Mitocondrio).
• Taglia preferenzialmente il DNA a doppio filamento contenente 5-idrossimetilcitosina (5hmC), mostrando una maggiore efficienza di taglio e specificità di sito per i DNA modificati (PubMed:25355512). Riferimenti correlati: PMID:25355512
• Presenta un'affinità significativamente maggiore per le giunzioni Holliday a quattro filamenti rispetto ai DNA doppi e a singolo filamento, suggerendo un ruolo nella ricombinazione del DNA (per similarità).
• Promuove la ricombinazione omologa conservativa quando i substrati sono modificati con 5hmC (PubMed:25355512). Riferimenti correlati: PMID:25355512
• Media l'autofagia sopprimendo la via mTOR attraverso l'interazione dipendente dalla fosforilazione con YWHAG e la risposta al danno del DNA indotta dalla sua attività endonucleasica (PubMed:33473107). Riferimenti correlati: PMID:33473107
• La fosforilazione mediata da GSK3-beta aumenta il legame di Endo G a YWHAG, che rilascia TSC2 e PIK3C3 da YWHAG, portando alla soppressione di mTOR e all'inizio dell'autofagia (PubMed:33473107). Riferimenti correlati: PMID:33473107
• Taglia il DNA mitocondriale (mtDNA) in risposta a stress ossidativi e nitrosativi, indurre quindi la replicazione compensatoria del mtDNA (PubMed:29719607). Riferimenti correlati: PMID:29719607
• La proteina contiene legami disolfuro ed è regolata post-traduzionalmente tramite fosforilazione (Parole chiave: Legame disolfuro, Fosfoproteina).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 198–297 dell'Endo G umano. I ricercatori possono considerare di mappare questa regione su domini funzionali o strutturali noti per prevedere l'accessibilità dell'epitopo.
• Per le applicazioni di Western blot, Endo G migra a circa 33 kDa. Includere controlli positivi appropriati (ad esempio, frazioni mitocondriali da cellule umane, di topo o ratto) e convalidare la rilevazione nel tuo tipo di campione specifico.
• Data la sua localizzazione mitocondriale, un'estrazione efficiente della proteina può richiedere kit di isolamento mitocondriale o tamponi di lisazione ottimizzati per proteine di organelli.
• In ELISA, si può consigliare l'abbinamento con un anticorpo di cattura/rilevazione adatto; confermare la linearità e la sensibilità utilizzando Endo G ricombinante o lisati cellulari.
• La reattività incrociata è riportata per uomo, topo e ratto. Convalidare la specificità in ogni specie, specialmente se l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno varia.

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