Anticorpo policlonale di coniglio anti-Endotelina 1 (ET1, PPET1) per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P05305

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Endotelina 1

• L'Endotelina-1 (ET-1), codificata dal gene EDN1, appartiene alla famiglia delle endoteline e viene inizialmente sintetizzata come preproendotelina-1 (PPET1), un precursore di 212 amminoacidi processato in peptidi attivi tramite scissione su residui basici accoppiati e formazione di ponti disolfuro.
• Agisce come peptide vasocostrittore derivato dall'endotelio e probabile ligando per i recettori accoppiati a proteine G EDNRA e EDNRB, innescando la segnalazione di PTK2B, BCAR1, BCAR3 e delle GTPasi RAP1 e RHOA nelle cellule mesangiali glomerulari.
  Riferimenti correlati: PMID:19086031
• Inoltre, ET-1 lega il recettore DEAR/FBXW7-AS1, espandendo il suo repertorio funzionale oltre i classici recettori delle endoteline.
  Riferimenti correlati: PMID:17446437
• Attraverso la segnalazione ROCK, ET-1 promuove il rimodellamento della parete arteriosa mesenterica, facilitando la traslocazione nucleare di NFATC3 e la trascrizione di marcatori di ipertrofia della muscolatura liscia come ACTA2.
• La proteina è secreta e mostra un'espressione tissuto-specifica nel polmone, nei vasi delle villosità staminali placentari e nelle cellule muscolari lisce vascolari placentari coltivate, evidenziando il suo ruolo nella fisiologia vascolare respiratoria e riproduttiva.
• Le caratteristiche chiave del processamento post-traduzionale includono la scissione su coppie di residui basici e la formazione di ponti disolfuro, come annotato; le parole chiave indicano anche il suo stato di vasocostrittore e di proteoma di riferimento.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 18-212 della preproteina dell'Endotelina-1 umana (NP_001946.3), coprendo la maggior parte della sequenza precursore. Questo design può riconoscere sia la preproteina full-length che le sue forme processate proteoliticamente; si consiglia di validare la rilevazione delle isoforme specifiche nel vostro sistema di campioni.
• Per il Western blotting (WB), si può osservare una banda intorno ai 24 kDa corrispondente alla preproteina, ma in condizioni riducenti potrebbero apparire bande aggiuntive da peptidi processati (ad esempio big endotelina-1 ~4-5 kDa, ET-1 matura ~2,5 kDa). Ottimizzare di conseguenza la percentuale di gel e le condizioni di trasferimento.
• Nell'immunocitochimica (IF/ICC) e nell'immunoistochimica (IHC-P), assicurare una fissazione e permeabilizzazione adeguate per una accessibilità ottimale dell'epitopo e includere controlli di blocco peptidico per confermare la specificità se necessario.
• Per le applicazioni ELISA, testare l'accoppiamento e la diluizione dell'anticorpo nel vostro sistema di matrice, poiché le prestazioni possono variare in base al tipo di campione e al formato del saggio.

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