Anticorpo monoclonale Anti-eNOS per WB, IHC-P, ELISA - P29474

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di eNOS

• eNOS (NOS3) genera ossido nitrico (NO), una molecola di segnalazione gassosa che rilassa la muscolatura liscia vascolare tramite cGMP. Riferimenti correlati: PMID:1378832
• L'NO prodotto da eNOS guida anche l'angiogenesi coronarica indotta da VEGF e facilita la coagulazione mediata dalle piastrine.
• Il gene NOS3 produce due isoforme; l'isoforma 2 manca di attività catalitica e agisce come regolatore dominante negativo eterodimerizzando con l'isoforma 1.
• eNOS si localizza principalmente nelle caveole della membrana plasmatica, ma si associa anche all'apparato di Golgi, al citoscheletro e al citoplasma.
• È espresso in piastrine, placenta, fegato e rene.
• eNOS è un enzima multidisciplinare che richiede FAD, FMN, NADPH, eme, calcio e calmodulina per l'attività, ed è regolato da miristoilazione, palmitoilazione e fosforilazione.
• Appartiene alla famiglia delle sintasi dell'ossido nitrico; il suo peso molecolare è di circa 133 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende il segmento C-terminale (aa 1035–1110) di eNOS umano, che può distinguere l'isoforma attiva a lunghezza intera dalle varianti troncate; confermare la specificità utilizzando saggi isoforma-specifici.
• Per il Western blot, è prevista una banda a ~133 kDa; includere lisati endoteliali (es. HUVEC) come controlli positivi e utilizzare condizioni riducenti appropriate.
• Nell'analisi immunoistochimica (paraffina), il recupero dell'antigene (es. tampone citrato, pH 6.0) e tessuti con elevata espressione endogena di eNOS (es. placenta, rene) sono raccomandati come passi iniziali di validazione.
• Le prestazioni dell'ELISA dipendono dal formato di rivestimento e dal sistema di rilevamento; la reattività incrociata con eNOS di ratto e topo consente flessibilità nei saggi abbinati per specie.

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