Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Epac1/RAPGEF3 per WB, IHC-P, ELISA - O95398

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Epac1/RAPGEF3

• Codificato dal gene RAPGEF3, Epac1 (Exchange Protein directly Activated by cAMP 1) è un fattore di scambio di nucleotidi guaninici (GEF) regolato da cAMP che attiva specificamente le piccole GTPasi RAP1A e RAP2A.
• Come mediatore chiave della segnalazione cAMP, Epac1 modula processi fisiologici tra cui l'angiogenesi e il controllo dinamico della funzione di barriera endoteliale attraverso una via indipendente da Rho.
• Epac1 facilita l'assemblaggio di un complesso di segnalazione che coinvolge PDE3B e PIK3R6, che porta all'attivazione del complesso PI3K gamma, sottolineando ulteriormente il suo ruolo nella segnalazione cAMP compartimentalizzata.
• La proteina è essenziale per il rimodellamento del citoscheletro di actina alle giunzioni cellula-cellula, inclusa la formazione di fibre di stress e actina giunzionale, mantenendo così l'integrità endoteliale.
• Epac1 è localizzato al sistema delle membrane endoplasmatiche ed è ampiamente espresso nei tessuti, con i livelli più alti osservati nel rene adulto, cuore, tiroide, cervello e rene fetale.
• La sua attività è strettamente regolata dal legame diretto del cAMP al suo dominio di legame dei nucleotidi ciclici, classificandolo come un fattore di scambio di nucleotidi legante il cAMP.
• È stata riportata la fosforilazione post-traduzionale e lo splicing alternativo genera multiple isoforme, espandendo la sua diversità funzionale.
• Le parole chiave da UniProt includono: struttura 3D, Angiogenesi, cAMP, legame cAMP, fattore di rilascio di nucleotidi guaninici, Membrana, legame nucleotidi, Fosfoproteina, identificazione proteomica, proteoma di riferimento.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide C-terminale (aa 824-923) di Epac1 umano; confermare che questa regione sia presente nella tua isoforma target se si considera lo splicing alternativo.
• Vista la robusta espressione tessuto-specifica, considerare l'uso di lisati da rene umano, cuore o cervello come controlli positivi per il Western blotting.
• Per l'immunoistochimica, validare l'anticorpo su sezioni fissate in formalina e incluse in paraffina (FFPE), impiegando il recupero dell'antigene se necessario; includere tessuti di topo e ratto come controlli di reattività incrociata.
• Eseguire diluizioni seriali per determinare le concentrazioni ottimali per ogni applicazione; gli intervalli di partenza tipici per gli anticorpi monoclonali di coniglio sono 1:500–1:2000 per WB e 1:100–1:500 per IHC.
• Quando si eseguono Western blot, il peso molecolare previsto è di ~104 kDa; utilizzare percentuali di gel appropriate (es. 8% SDS-PAGE) e tempi di trasferimento estesi per proteine ad alto peso molecolare.

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