Anticorpo policlonale di coniglio anti-EPB41 per WB, IP, ELISA - P11171

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di EPB41

• La proteina 4.1 (EPB41, 4.1R) è una proteina strutturale multifunzionale, identificata originariamente come componente principale dello scheletro della membrana eritrocitaria.
• Stabilizza la rete spettro-actina, regolando così la stabilità meccanica e la deformabilità dei globuli rossi.
• Nelle cellule non eritroidi, EPB41 è necessaria per il reclutamento corticale del complesso dineina-dinactina e di NUMA1 durante l'anafase, garantendo la corretta progressione mitotica (PubMed:23870127).
  Riferimenti correlati:
  PMID:23870127
• EPB41 interagisce con la calmodulina e contiene siti di legame per actina, spett rina e altre proteine associate alla membrana; inoltre, è soggetta a un ampio splicing alternativo che genera molteplici isoforme.
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui la fosforilazione e l'O-glicosilazione, regolano la sua associazione con il citoscheletro e la membrana.
• La localizzazione subcellulare comprende il citoplasma, la corteccia cellulare, il citoscheletro e il nucleo, riflettendo i suoi diversi ruoli funzionali.
• Le mutazioni in EPB41 sono associate all'ellittocitosi ereditaria e alla piropoichilocitosi, anemie emolitiche caratterizzate da eritrociti di forma anomala e fragili.
• La proteina ha un peso molecolare di circa 97 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, aspettarsi una banda intorno a 97 kDa; convalidare l'espressione in lisati eritrocitari o in linee cellulari nucleate pertinenti.
• Durante l'immunoprecipitazione, utilizzare tamponi di lisi appropriati che preservino le interazioni citoscheletriche; considerare una fase di centrifugazione a bassa velocità per pre-chiarificare il lisato.
• Poiché l'immunogeno è un peptide della regione compresa tra 700 e 800 amminoacidi, la specificità può essere confermata mediante knockdown mediato da siRNA o confrontando i risultati con una linea cellulare priva di espressione di EPB41.
• Per l'ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e considerare l'utilizzo di frammenti proteici ricombinanti come standard.
• Questo anticorpo policlonale può riconoscere più isoforme di EPB41 a causa dello splicing alternativo; verificare l'identità delle bande rilevate mediante spettrometria di massa o sonde specifiche per isoforma.

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