Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-EpCAM per WB, IF/ICC, ELISA - P16422

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di EpCAM

• EpCAM (Molecola di adesione cellulare epiteliale), nota anche come TACSTD1, TROP1, EGP40 e CD326, è una glicoproteina transmembrana di tipo I di ~35 kDa che agisce come molecola di adesione cellulare omofilica.
• Media interazioni omofiliche indipendenti dal calcio tra cellule epiteliali intestinali e linfociti intraepiteliali, contribuendo alla barriera immunologica alle superfici mucose e fornendo una prima linea di difesa contro le infezioni.
• EpCAM svolge un ruolo nella proliferazione e differenziazione delle cellule staminali embrionali (ESC), e la sua espressione diminuisce rapidamente dopo la differenziazione delle ESC; regola positivamente l'espressione di FABP5, MYC e delle cicline A ed E.
• La proteina si localizza sulla membrana cellulare laterale ed è arricchita nelle giunzioni strette, in linea con il suo ruolo nell'adesione cellula-cellula e nell'integrità della barriera epiteliale.
• EpCAM è espressa in modo elevato e selettivo nelle ESC indifferenziate e si trova sulla superficie di quasi tutte le membrane cellulari epiteliali, ma è assente nelle cellule mesodermiche e neurali; è rilevata anche sulle cellule di adenocarcinoma.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione e formazione di legami disolfuro; EpCAM contiene un peptide segnale, un dominio extracellulare con ripetizioni di tipo tireoglobulina 1, una singola elica transmembrana e una breve coda citoplasmatica; è riconosciuta come antigene tumorale e come variante di malattia nel cancro colorettale ereditario non poliposico (HNPCC).

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aminoacidi 24–265), probabilmente accessibile nella conformazione nativa; questo design può supportare applicazioni come WB, IF/ICC ed ELISA.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 35 kDa; tuttavia, a causa della glicosilazione e di altre modifiche, la banda osservata può migrare in modo diverso. Validare in lisati di cellule epiteliali umane, di topo o di ratto pertinenti.
• In IF/ICC, concentrarsi sulla colorazione di membrana con arricchimento giunzionale punteggiato; una permeabilizzazione appropriata è fondamentale. Includere controlli appropriati (ad es., linee di ESC indifferenziate vs. differenziate) per confermare la specificità.
• È stata riportata reattività crociata con topo e ratto, ma le prestazioni in ciascuna applicazione dovrebbero essere validate indipendentemente nel sistema di campioni specifico di interesse.

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