Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-EPHA5 per WB, IF/ICC, ELISA - P54756

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di EPHA5

• Il recettore efrina di tipo A 5 (EPHA5), noto anche come EHK-1, EK7 o TYRO4, è un membro della sottofamiglia dei recettori efrina delle tirosin-chinasi recettoriali che legano ligandi efrina-A ancorati a GPI, con EFNA5 che probabilmente funge da suo ligando cognato primario.
• In seguito al legame del ligando, EPHA5 media una segnalazione bidirezionale dipendente dal contatto: segnalazione in avanti attraverso il recettore e segnalazione inversa attraverso il ligando efrina, orchestrando processi di sviluppo critici.
• EPHA5 funge da molecola di guida assonale, essenziale per la formazione delle vie retinotettale, entorino-ippocampale e ippocampo-settale durante lo sviluppo del sistema nervoso.
• Nel cervello adulto, EPHA5 contribuisce alla plasticità sinaptica regolando la sinaptogenesi, evidenziando il suo ruolo al di là dello sviluppo embrionale.
• Oltre al sistema nervoso, l'interazione tra EPHA5 e EFNA5 media la comunicazione tra le cellule delle isole pancreatiche, regolando la secrezione di insulina stimolata dal glucosio (Per somiglianza).
• A livello subcellulare, EPHA5 si localizza sulla membrana cellulare ed è arricchito nelle proiezioni cellulari come assoni e dendriti, in linea con il suo ruolo nella connettività neuronale.
• La proteina è espressa quasi esclusivamente nel sistema nervoso, in particolare nei neuroni corticali, nelle cellule di Purkinje cerebellari e nei neuroni piramidali, con un gradiente di espressione crescente dal proencefalo al rombencefalo e al midollo spinale.
• EPHA5 subisce splicing alternativo e modificazioni post-traduzionali inclusa glicosilazione e fosforilazione, caratteristiche comuni alle tirosin-chinasi recettoriali che modulano l'attività di segnalazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende la regione N-terminale (aminoacidi 1-130) di EPHA5 umano, che include il peptide segnale e parte del dominio di legame del ligando efrina; questo design può fornire specificità per la porzione extracellulare del recettore.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 115 kDa; a causa della glicosilazione, la banda osservata potrebbe apparire leggermente più alta. Considerare l'uso di lisati di controllo positivo da tessuto cerebrale o linee cellulari neuronali (es. SH-SY5Y) note per esprimere EPHA5.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), ci si aspetta che EPHA5 si localizzi sulla membrana cellulare e all'interno delle proiezioni neuronali come assoni e dendriti. Convalidare i pattern di colorazione in neuroni primari coltivati o linee cellulari neuronali, e includere controlli appropriati per confermare la specificità.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per rilevare EPHA5 in lisati cellulari o omogenati tissutali; tuttavia, si raccomanda l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e rilevamento in base alla matrice del campione.
• Data la reattività incrociata con topo e ratto, questo anticorpo è adatto per studi su modelli roditori, ma confermare i livelli di espressione nel tessuto target, poiché EPHA5 mostra gradienti specifici per regione nel sistema nervoso.

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