Anticorpo policlonale anti-EPPIN per WB, EL-ISA - O95925

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'EPPIN

• EPPIN (Inibitore della proteasi epididimale), noto anche come antigene cancro/testicolo 71 (CT71), è un membro della famiglia del dominio nucleare a quattro disolfuri WAP (WFDC7) e contiene sia domini Kunitz che WAP.
• Funziona come inibitore della serina proteasi critico per la fertilità maschile, modulando l'idrolisi della seminogelina-1 (SEMG1) da parte dell'antigene prostatico specifico (PSA/KLK3). EPPIN si lega alla SEMG1, inibendo la motilità degli spermatozoi e fornendo protezione antimicrobica nel coagulo dell'eiaculato.
• EPPIN è localizzato sulla superficie cellulare e secreto, ricoprendo la superficie degli spermatozoi testicolari ed eiaculati. È espresso dalle cellule di Sertoli nel testicolo e dalle cellule epiteliali nell'epididimo.
• La proteina presenta splicing alternativo, producendo l'isoforma 2 che viene espressa specificamente nell'epididimo.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono più legami disolfuro, caratteristici del dominio WAP, che contribuiscono alla sua stabilità e funzione.
• EPPIN possiede attività antimicrobica, proteggendo gli spermatozoi all'interno del coagulo dell'eiaculato.
• L'espressione tessuto-specifica è predominante nel testicolo e nell'epididimo, con debole espressione nelle cellule mioidi e nelle cellule spermatogeniche.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro una proteina ricombinante corrispondente alla regione N-terminale (aa 22-133) dell'EPPIN umano, che comprende i domini Kunitz e WAP. Questa regione è conservata tra le specie, coerente con la reattività crociata osservata con topo e ratto.
• Per il Western blotting, l'EPPIN endogeno viene rilevato a circa 15 kDa; considerare l'ottimizzazione della preparazione del campione da lisati di tessuto testicolare o epididimale.
• Per le applicazioni ELISA, validare l'anticorpo in formato diretto o a sandwich utilizzando EPPIN ricombinante o fluidi biologici come il plasma seminale.
• A causa della natura secreta dell'EPPIN, i sobrenatanti di coltura cellulare da linee cellulari di Sertoli o epididimali possono essere fonti adatte per il rilevamento.

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