Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-ERAP1 per WB, IHC-P, ELISA - Q9NZ08

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ERAP1

• ERAP1 (Aminopeptidasi 1 del reticolo endoplasmatico) è un enzima critico nell'immunità adattativa, che taglia i precursori peptidici antigenici a lunghezze ottimali (8-10 residui) per il caricamento sulle molecole MHC di classe I.
• Mostra una forte preferenza per la lunghezza del substrato, elaborando efficientemente peptidi di 9-16 aminoacidi, e tipicamente interrompe il taglio dopo aver generato un 9-mero.
• Idrolizza preferenzialmente leucina e peptidi con C-terminali idrofobici, mostrando una debole attività verso i residui terminali carichi, modellando così l'immunopeptidoma.
• Oltre all'elaborazione degli antigeni, ERAP1 inattiva l'angiotensina II e genera bradichinina, suggerendo un ruolo nella regolazione della pressione sanguigna all'interno del rene.
• La proteina si localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico, ancorata da un peptide segnale e un dominio transmembrana N-terminale.
• Esprime in modo ubiquitario in tutti i tessuti umani, riflettendo il suo ruolo di "housekeeping" nel turnover dei peptidi.
• Contiene caratteristiche strutturali chiave: dominio metalloproteasico legante lo zinco, ponti disolfuro, siti di N-glicosilazione; classificata tra proteasi, idrolasi e proteine correlate all'immunità.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (a.a. 842-941) mira a una regione C-terminale; verificare che questo epitopo sia accessibile nel vostro campione target in condizioni native e denaturanti.
• Per il Western blot, utilizzare condizioni riducenti e aspettarsi una banda a ~107 kDa; confermare la specificità con lisati knockdown o knockout.
• Nell'IHC-paraffina, testare i metodi di recupero dell'antigene (indotto dal calore, pH 6 o pH 9) poiché ERAP1 è una proteina di membrana; utilizzare una controcolorazione per valutare la morfologia tissutale.
• Reagisce in modo incrociato con ERAP1 di topo e ratto, ma l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno dovrebbe essere verificata se si utilizzano altre specie; validare nel vostro sistema.
• Le prestazioni in ELISA dipendono dal formato di coating; considerare l'uso dell'anticorpo come cattura o rivelazione, e abbinarlo a un anticorpo secondario compatibile per saggi sandwich.

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