Anticorpo policlonale coniglio anti-ErbB4/HER4 per WB e ELISA - Q15303

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ErbB4/HER4

• Il recettore tirosin-chinasi proteico erbB-4, noto anche come HER4 o p180erbB4, appartiene alla famiglia dei recettori del fattore di crescita epidermico (EGFR/ERBB).
• Funziona come recettore di superficie cellulare per le neureguline (NRG1-4) e i membri della famiglia EGF (BTC, EREG, HBEGF), innescando dimerizzazione, autofosforilazione e cascate di segnalazione a valle.
• Gioca ruoli essenziali nella differenziazione del muscolo cardiaco, nello sviluppo del sistema nervoso centrale embrionale (migrazione della cresta neurale, guida degli assoni) e nella differenziazione e lattazione della mammella.
• Lo splicing alternativo genera le isoforme JM-A e JM-B, ciascuna con le varianti CYT-1 e CYT-2; l'isoforma JM-A subisce un processo proteolitico, rilasciando domini intracellulari solubili (4ICD) che si traslocano nel nucleo o nei mitocondri.
• Il 4ICD nucleare colocalizza con STAT5A per attivare la trascrizione dei geni delle proteine del latte; il 4ICD mitocondriale promuove l'apoptosi.
• Segnalazione specifica per isoforma: le isoforme CYT-1 attivano la via PI3K/AKT tramite la fosforilazione di PIK3R1, proteggendo dall'apoptosi e promuovendo la migrazione; le isoforme CYT-2 mancano della fosfotirosina per il legame di PIK3R1.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare (recettore a lunghezza intera), il nucleo e il mitocondrio (domini intracellulari solubili).
• Espresso ai livelli più alti nel cervello, cuore e rene; trovato anche nel muscolo scheletrico, paratiroide, cervelletto, ipofisi, milza, testicolo e mammella.
• Modificazioni post-traduzionali: glicoproteina, fosfoproteina, legami disolfuro e coniugazione dell'ubiquitina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• La sequenza immunogenica (aa 1150–1250) si trova all'interno del dominio intracellulare, a monte delle varianti della coda CYT-1/CYT-2, e potrebbe rilevare più isoforme; considerare questo nell'interpretazione dei risultati specifici per isoforma.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è 147 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. 6–8% SDS-PAGE) e tempi di trasferimento prolungati per un blotting efficiente di proteine ad alto peso molecolare.
• Validare l'anticorpo in tipi di campioni biologicamente rilevanti noti per esprimere ErbB4, come linee cellulari di cervello, cuore o cancro al seno umano, e in tessetti di ratto con reattività crociata.
• Essendo un anticorpo policlonale, potrebbe presentare variabilità da lotto a lotto; confermare la reattività e la specificità con appropriati controlli positivi e negativi nel proprio sistema sperimentale.

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