Anticorpo policlonale di coniglio anti-ERCC3 per WB, ELISA - P19447

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ERCC3

• ERCC3 (XPB) è la subunità da 89 kDa del complesso centrale del fattore generale di trascrizione e riparazione del DNA IIH (TFIIH), noto anche come subunità da 89 kDa del fattore basale di trascrizione 2 (BTF2 p89).
• Funziona come elicasi/traslocasi del DNA 3'-5' ATP-dipendente, legandosi al DNA a doppio filamento e aprendolo mediante l'attività di traslocasi anziché attraverso un'azione elicasica classica. Riferimenti correlati:
  PMID:27193682, PMID:33902107
• Nell'inizio della trascrizione, ERCC3 è essenziale per l'apertura del promotore e la fuga dal promotore; la sua attività elicasica ATP-dipendente induce e propaga una torsione del DNA per aprire il promotore. Riferimenti correlati:
  PMID:10024882, PMID:8157004, PMID:27193682, PMID:33902107
• Nella riparazione per escissione dei nucleotidi (NER), ERCC3 contribuisce all'apertura del DNA intorno alle lesioni; l'attività ATPasica, ma non quella elicasica, è necessaria per la fusione iniziale del DNA, mentre XPA lo mantiene all'estremità 5' di una bolla di DNA. Riferimenti correlati:
  PMID:17466626, PMID:2111438, PMID:31253769
• ERCC3 è localizzato esclusivamente nel nucleo.
• Partecipa alle interazioni ospite-virus ed è associato a malattie quali xeroderma pigmentoso, sindrome di Cockayne e tricoti, quando è mutato.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione; è una fosfoproteina.
• La proteina ha un peso molecolare di 89.278 Da ed è coinvolta in processi cellulari essenziali, tra cui la regolazione della trascrizione, la riparazione del DNA e la risposta al danno del DNA.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato corrisponde agli amminoacidi 512–782 di ERCC3 umano (NP_000113.1); questa regione può generare anticorpi in grado di riconoscere sia ERCC3 a lunghezza intera sia potenziali isoforme.
• Per il Western blot, prendere in considerazione l'uso di estratti nucleari o lisati cellulari totali provenienti da linee cellulari umane, di topo o di ratto; la dimensione prevista della banda è di circa 89 kDa.
• L'ELISA può essere utilizzato per quantificare i livelli di ERCC3 o per lo screening, ma è necessario ottimizzare le condizioni di ricoprimento e rilevazione in base al formato specifico del test.
• Poiché ERCC3 è un componente del complesso TFIIH, gli esperimenti di co-immunoprecipitazione possono richiedere un'attenta ottimizzazione per mantenere l'integrità del complesso.
• Quando si studiano la riparazione del DNA o la trascrizione, convalidare le prestazioni dell'anticorpo nel sistema di campioni pertinente in condizioni indotte o basali.

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