Anticorpo policlonale di coniglio anti-ERK5 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13164

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ERK5

• ERK5 (nota anche come Big MAP kinase 1 (BMK-1) o MAPK7) è una serina/treonina-protein chinasi appartenente alla famiglia delle MAP chinasi, che svolge un ruolo fondamentale nella proliferazione, differenziazione e sopravvivenza cellulare.
• Viene attivata specificamente dalla chinasi MAP2K5 (MEK5) a monte, determinandone la traslocazione nel nucleo, dove fosforila fattori di trascrizione come MEF2C.
• La stimolazione con EGF attiva ERK5 attraverso una via dipendente da MAP2K5 ma indipendente da Ras, distinta dalla classica cascata di segnalazione ERK1/2.
• Nei cardiomiociti, ERK5 agisce come regolatore negativo dell'apoptosi interagendo con STUB1/CHIP per promuovere l'ubiquitinazione e la degradazione delle isoforme pro-apoptotiche ICER di CREM.
• ERK5 contribuisce alla funzione endoteliale e all'integrità dei vasi sanguigni e può essere coinvolta nella differenziazione delle cellule muscolari.
• Fosforila SGK1 in Ser-78, una modificazione necessaria per la progressione del ciclo cellulare indotta dai fattori di crescita.
• A livello subcellulare, ERK5 si trova nel citoplasma e nel nucleo e, in seguito all'attivazione, si concentra nei corpi nucleari PML.
• È espressa in molti tessuti adulti, con la maggiore abbondanza nel cuore, nella placenta, nei polmoni, nei reni e nel muscolo scheletrico, mentre non è rilevabile nel fegato.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-310) di ERK5 umano, pertanto può rilevare sia le isoforme a lunghezza intera sia eventuali isoforme troncate all'estremità N-terminale. Si consiglia la validazione nel sistema campione pertinente.
• Per il Western blot, è prevista una banda in prossimità del peso molecolare atteso di 88 kDa; si consiglia di utilizzare lisati di controllo positivo appropriati (ad es. HeLa, HEK293 o campioni di tessuto con elevata espressione di ERK5, come cuore o muscolo scheletrico).
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunocitochimica (IF/ICC), può essere necessario ottimizzare le fasi di recupero antigenico e permeabilizzazione per consentire l'accesso alle riserve nucleari di ERK5. Utilizzare tessuti o cellule di controllo positivi e negativi per confermare la specificità della colorazione.
• Per l'ELISA, sia come anticorpo di cattura sia come anticorpo di rilevazione, è necessario valutare la reattività crociata con altre MAP chinasi; si raccomanda di eseguire test con ERK1, ERK2 o JNK ricombinanti per confermare la specificità.
• Considerata la reattività crociata riportata con topo e ratto, questo anticorpo è adatto per studi traslazionali su queste specie; tuttavia, si raccomanda l'allineamento delle sequenze della regione immunogena per confermare la conservazione dell'epitopo.

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