Anticorpo policlonale di coniglio Anti-ERp29 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P30040

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ERp29

• ERp29, noto anche come ERp28, ERp31, PDIA9 e PDI-DB, è una proteina residente nel reticolo endoplasmatico (RE) codificata dal gene ERP29 (C12orf8) nell'uomo.
• Non presenta attività di disolfuro isomerasi, ma svolge un ruolo critico nel processamento e nel ripiegamento delle proteine secretorie all'interno del lume del RE.
• ERp29 si localizza principalmente nel lume del RE ed è stato rilevato anche nei melanosomi, indicando un coinvolgimento nelle vie secretorie e di pigmentazione.
• La proteina è espressa in modo ubiquitario, con livelli più elevati nei tessuti secretori, in linea con la sua funzione proposta nella secrezione proteica.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione, e il gene subisce splicing alternativo, generando più varianti di trascritto.
• Gli studi strutturali (parola chiave struttura 3D in UniProt) hanno chiarito la sua organizzazione a domini, aiutando a comprendere le sue interazioni funzionali.
• Il peso molecolare previsto è di circa 29 kDa (UniProt: 28993 Da), in accordo con il peso proteico osservato in contesti sperimentali.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 33–261, che corrispondono alla proteina matura dopo la rimozione del peptide segnale; ci si aspetta che riconosca ERp29 sia nativo che denaturato in applicazioni come WB e IF/ICC.
• Per Western blot (WB) è prevista una banda vicino a 29 kDa; utilizzare buffer di lisura ottimizzati per proteine del lume del RE e includere inibitori di proteasi e fosfatasi.
• Nell'immunistochimica (IHC-P), il recupero dell'antigene (ad esempio, con buffer citrato a calore) può migliorare la colorazione nei tessuti FFPE; convalidare utilizzando tessuti secretori con nota elevata espressione di ERp29.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), la permeabilizzazione è essenziale per accedere al lume del RE; la co-colorazione con marcatori del RE (ad esempio, calnessina) può confermare la specificità di localizzazione.
• I saggi basati su ELISA possono essere ottimizzati utilizzando l'immunogeno ricombinante come standard di riferimento; le opportune fasi di blocco e lavaggio devono essere determinate empiricamente.
• La segnalata reattività incrociata con ERp29 di topo e ratto (84% e 83% di identità di sequenza, rispettivamente) supporta studi cross-specie; tuttavia, si raccomanda la convalida nel sistema di campione pertinente.

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