Anticorpo Monoclonale Anti-ETFDH per WB, IF, IHC, ELISA - Q16134

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ETFDH

• ETFDH (flavoproteina deidrogenasi transfertrice di elettroni-ubichinone, nota anche come ETF deidrogenasi) è una flavoproteina della membrana interna mitocondriale che accoppia la β-ossidazione degli acidi grassi e il catabolismo degli amminoacidi alla catena respiratoria trasferendo elettroni dalla flavoproteina transfertrice di elettroni (ETF) all'ubichinone.
• L'enzima contiene FAD e un cluster 4Fe-4S, funzionando come ossidoreduttasi e partecipando al trasporto di elettroni e al metabolismo lipidico.
• Le mutazioni in ETFDH causano l'aciduria glutarica di tipo II (deficienza multipla di acil-CoA deidrogenasi, MADD), evidenziando il suo ruolo nella malattia metabolica.
• Si localizza sulla membrana interna mitocondriale, con un peptide di transito che ne dirige l'importazione mitocondriale.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, identificate tramite proteomica; lo splicing alternativo genera multiple isoforme.
• Il peso molecolare previsto dalla sequenza amminoacidica è di circa 68,5 kDa, coerente con la banda osservata di 68 kDa nei western blot.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (aa 480–617) di ETFDH umano, un segmento conservato tra umano, mouse e ratto, a supporto dei dati di reattività incrociata.
• Per il western blotting, è prevista una banda vicino a 68 kDa; validare il rilevamento in lisati di tessuti o cellule pertinenti e considerare l'ottimizzazione del carico proteico e delle condizioni di blocco.
• Quando si eseguono immunofluorescenza o immunochimica, assicurarsi di un'adeguata permeabilizzazione e, per IHC-P, ottimizzare il recupero dell'antigene; validare la colorazione in campioni di controllo positivi e negativi appropriati.
• Nelle applicazioni ELISA, testare i formati diretti o a sandwich e titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il saggio specifico.
• Data la localizzazione mitocondriale di ETFDH, la frazionamento subcellulare o l'arricchimento mitocondriale possono migliorare la sensibilità di rilevamento in certi tipi di campioni.

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