Anticorpo policlonale coniglio anti-EXOSC3 per WB, ELISA - Q9NQT5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di EXOSC3

• EXOSC3, noto anche come componente del complesso esosomiale RRP40, proteina 40 per la lavorazione dell'RNA ribosomiale o p10, è un componente principale dell'esosoma di RNA, un complesso multi-subunità con attività esoribonucleasica 3'→5'.
• Come parte del core cataliticamente inattivo Exo-9, EXOSC3 stabilizza l'anello esamerico delle subunità con dominio RNase PH tramite contatti con EXOSC9 e EXOSC5, fungendo da scaffold per l'associazione delle subunità catalitiche e dei fattori accessori.
• L'esosoma di RNA partecipa alla lavorazione nucleare e alla maturazione di RNA stabili, inclusi rRNA, snRNA e snoRNA, e rimuove i sottoprodotti della lavorazione e trascrizioni non codificanti pervasive come l'RNA antisenso e i PROMPT.
• Nel citoplasma, il complesso è coinvolto nel turnover generale dell'mRNA, in particolare nella degradazione di mRNA intrinsecamente instabili che contengono elementi ricchi di AU (ARE) nelle loro 3'UTR, e contribuisce alla sorveglianza dell'RNA prevenendo la traduzione di mRNA aberranti.
• L'esosoma contenente EXOSC3 svolge ruoli in processi specializzati: degradazione dell'istone mRNA, ricombinazione per cambio classe delle immunoglobuline (CSR) e ipermutazione somatica (SHM) tramite indirizzamento dell'attività di deaminazione di AICDA verso substrati di DNA a doppio filamento.
• Subcellularmente, EXOSC3 localizza prevalentemente nel nucleolo, ma anche nel nucleoplasma e nel citoplasma, riflettendo le sue diverse funzioni nel metabolismo dell'RNA.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e coniugazione con ubiquitina (legame isopeptidico), e la proteina è associata a varianti patologiche correlate alla neurodegenerazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-275) di EXOSC3 umana, che è conservata tra le specie; pertanto questo anticorpo è previsto che riconosca la proteina full-length in campioni umani, di topo e ratto.
• Per il Western blotting, è attesa una banda intorno a 30 kDa in base al peso molecolare calcolato; utilizzare controlli positivi appropriati (ad esempio lisati di tessuto HeLa, HEK293 o di topo/ratto) e validare con controlli di knockdown o knockout tramite siRNA se possibile.
• Per ELISA, considerare il rivestimento con proteina EXOSC3 ricombinante o lisati cellulari e ottimizzare empiricamente la diluizione dell'anticorpo e il sistema di rilevazione.
• A causa della natura policlonale, la coerenza tra lotti deve essere confermata per applicazioni critiche; raccomandiamo di eseguire una validazione interna nel contesto del vostro saggio specifico.

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