Anticorpo policlonale anti-EXT2 per WB, IF/ICC, ELISA - Q93030

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'EXT2

• Codifica per l'exostosina-2, una glicosiltransferasi di membrana transmembrana di tipo II che funge da sottounità critica del co-polimero dell'eparan solfato (HS); i nomi alternativi includono Glucuronosil-N-acetilglucosaminil-proteoglicano 4-alfa-N-acetilglucosaminiltransferasi e Proteina delle esostosi multiple 2.
• Forma un complesso eterodimerico con EXT1 per costituire il polimero HS attivo; insieme catalizzano l'allungamento processivo dello scheletro dell'HS alternando l'aggiunta di residui di acido D-glucuronico (GlcA) e N-acetil-D-glucosamina (GlcNAc) dai rispettivi donatori di zuccheri UDP. Riferimenti correlati: PMID:22660413, PMID:36402845, PMID:36593275
• La sottounità EXT1 fornisce l'attività glucuronosiltransferasi, mentre EXT2 è responsabile dell'attività N-acetilglucosaminiltransferasi; entrambe sono necessarie per la piena funzione del polimero e per la sintesi della catena HS. Riferimenti correlati: PMID:36402845, PMID:36593275
• I proteoglicani dell'eparan solfato risultanti sono componenti onnipresenti della matrice extracellulare e delle superfici cellulari, svolgendo ruoli essenziali nell'omeostasi dei tessuti, nella segnalazione dei fattori di crescita e nell'adesione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:19344451, PMID:22660413
• Si localizza principalmente alla membrana dell'apparato di Golgi, con presenza nella rete cis-Golgi e nella membrana del reticolo endoplasmatico; è stata riportata anche una forma secreta.
• Espressa ampiamente in diversi tessuti.
• Le mutazioni in EXT2 sono associate a esostosi multiple ereditarie, un disturbo autosomico dominante caratterizzato da escrescenze osse con cappuccio cartilagineo; la proteina è anche classificata come un soppressore tumorale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 80–340) copre il dominio catalitico dell'EXT2; l'anticorpo policlonale risultante è previsto per riconoscere più epitopi all'interno di questa regione, fornendo una rilevazione robusta per il Western blotting denaturante e per applicazioni native come IF/ICC.
• Per il Western blotting, considerare un intervallo di diluizione dell'anticorpo primario di 1:500–1:2000 e convalidare rispetto al peso molecolare previsto di ~82 kDa; si raccomanda l'inclusione di controlli appropriati (es. lisati con sovraespressione di EXT2 o campioni trattati con siRNA).
• Nell'immunofluorescenza/ICC, l'EXT2 mostra tipicamente un pattern di colorazione perinucleare di tipo Golgi; la permeabilizzazione della membrana con Triton X-100 allo 0,1% può migliorare l'accessibilità preservando la morfologia degli organelli.
• Le prestazioni ELISA sono supportate dall'immunogeno proteico ricombinante; considerare l'utilizzo dell'anticorpo come reagente di cattura o rilevazione in configurazioni ELISA a sandwich per la ricerca su biomarcatori correlati all'HS.
• È stata dimostrata la reattività crociata con l'EXT2 di topo e ratto, consentendo l'uso in modelli roditori; tuttavia, è consigliabile verificare la specificità nella specie e nel tessuto pertinenti prima di studi su larga scala.

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