Anticorpo policlonale di coniglio anti-EYA3 per WB, IF/ICC, ELISA - Q99504

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di EYA3

• La fosfatasi proteica EYA3, nota anche come omologo 3 di Eyes absent, è codificata dal gene EYA3 (UniProt: Q99504). Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme.
• Funzione principale: fosfatasi della tirosina che defosforila specificamente la 'Tyr-142' dell'istone H2AX. Questa modificazione svolge un ruolo centrale nella distinzione tra le risposte di riparazione del DNA e quelle apoptotiche allo stress genotossico.
• Promuove una riparazione efficiente del DNA defosforilando H2AX e favorendo così il reclutamento di complessi di riparazione del DNA contenenti MDC1. Riferimenti correlati: PMID:19234442 PMID:19351884
• Agisce come coattivatore trascrizionale per le proteine della famiglia SIX (SIX1, SIX2, SIX4, SIX5), collegando l'attività fosfatasica alla regolazione dei geni dello sviluppo.
• Localizzazione subcellulare: presente sia nel citoplasma sia nel nucleo, in accordo con i suoi doppi ruoli nella segnalazione e nella regolazione della cromatina.
• Classificata in molteplici categorie funzionali: regolatore della cromatina, danno al DNA, riparazione del DNA, proteina dello sviluppo, trascrizione e fosfatasi proteica.
• Potrebbe essere coinvolta nello sviluppo degli occhi, sulla base dell'omologia di sequenza e di studi funzionali.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-300 di EYA3 umano e copre la regione N-terminale. Questa sequenza è altamente conservata, ma gli utenti devono verificare la reattività nella specie specifica o nelle varianti di splicing.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto della proteina è di circa 63 kDa (PM teorico di 62,7 kDa); osservare una banda prossima a questo peso molecolare nei lisati di campioni umani e di ratto.
• Sulla base delle applicazioni indicate (WB, IF/ICC, ELISA), valutare l'utilizzo iniziale di diluizioni anticorpali standard e ottimizzarle in base al campione specifico e al sistema di rilevazione.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica, considerare la localizzazione citoplasmatica e nucleare; una fissazione e una permeabilizzazione appropriate sono fondamentali per il rilevamento del segnale.
• Validare la specificità utilizzando controlli appropriati, ad esempio il knockdown con siRNA o il blocco con peptide, per confermare il riconoscimento del bersaglio.

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