Anticorpo policlonale Anti-FAH per WB, IF/ICC, ELISA - P16930

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della FAH

• La fumarylacetoacetasi (FAH), nota anche come beta-dichetonasi o idrolasi fumarylacetatoacetica, è codificata dal gene FAH negli esseri umani. Lo splicing alternativo genera multiple isoforme.
• Come indicato dalla sua annotazione, la FAH funge da idrolasi nel passaggio finale del catabolismo della fenilalanina e della tirosina, catalizzando l'idrolisi del fumarylacetatoacetato in fumarato e acetoacetato.
• L'enzima richiede ioni metallici bivalenti, specificamente magnesio e calcio, per la sua attività catalitica.
• Le modifiche post-traduzionali della FAH includono acetilazione e fosforilazione, identificate tramite sequenziamento proteico diretto e analisi proteomiche.
• La FAH è espressa prevalentemente nel fegato e nel rene, con una minore rilevazione in vari altri tessuti.
• Le varianti della FAH associate alla malattia sono legate a disturbi metabolici, in particolare la tirosinemia di tipo I.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla FAH umana a lunghezza intera, potenzialmente permettendo il riconoscimento di multiple isoforme; verificare la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Per il Western blot, il peso proteico atteso è di circa 46 kDa; validare la banda rilevata utilizzando appropriati controlli positivi (es. lisati di fegato o rene) e considerare le condizioni di blocco per ridurre il legame non specifico.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), testare vari metodi di fissazione e permeabilizzazione per ottenere una colorazione nucleare/citoplasmatica ottimale basata sulla distribuzione subcellulare prevista della FAH.
• Per l'ELISA, la compatibilità della coppia di anticorpi dovrebbe essere determinata empiricamente; ottimizzare la concentrazione di rivestimento e le condizioni di rilevazione per il miglior rapporto segnale/rumore.
• Dato che l'anticorpo mostra reattività crociata con il mouse e il ratto, potrebbe essere adatto per studi comparativi tra specie; confermare la reattività nell'organismo modello pertinente.
• Includere sempre appropriati controlli positivi e negativi per garantire le prestazioni del saggio.

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