Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-FAK (Focal Adhesion Kinase) per WB, IF/ICC, ELISA - Q05397

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della FAK

• La Focal Adhesion Kinasi 1 (FAK) è una protein-tirosin chinasi non recettoriale essenziale per la regolazione della migrazione cellulare, dell'adesione, della diffusione, della riorganizzazione del citoscheletro di actina e della dinamica delle adesioni focali. Partecipa anche alla progressione del ciclo cellulare, alla proliferazione e all'apoptosi.
• La FAK è necessaria per lo sviluppo embrionale precoce, la formazione della placenta, l'angiogenesi e lo sviluppo normale del cuore e del sistema nervoso, inclusa la crescita assonale e la formazione delle sinapsi.
• Dopo l'attivazione, la FAK forma complessi di segnalazione multisubunità con SRC e membri della famiglia SRC, portando alla fosforilazione di residui di tirosina aggiuntivi che fungono da siti di legame per proteine scaffold, effettori e substrati, modulando così vie di segnalazione come PI3K/AKT e MAPK.
• La FAK fosforila NEDD9 dopo stimolazione delle integrine, contribuendo all'attivazione di RAC1 tramite i membri della famiglia CAS. Riferimenti correlati: PMID:9360983
• La proteina si localizza in più compartimenti subcellulari, tra cui adesioni focali, membrana cellulare, citoplasma perinucleare, corteccia cellulare, centrosoma, nucleo e corpo basale del ciglio, riflettendo il suo ruolo dinamico nella trasduzione del segnale e la meccano-trasduzione.
• L'isoforma 6 (FRNK) manca del dominio chinasi e agisce come inibitore dominante negativo della fosforilazione e della segnalazione della FAK, attenuando l'accumulo nucleare di LPXN e limitando la trascrizione genica dipendente dal fattore di risposta sierica (SRF).
• La FAK è espressa in modo ubiquitario e rilevata in linfociti B e T, fibroblasti polmonari e cellule epiteliali. Riferimenti correlati: PMID:31630787
• Appartiene alla superfamiglia delle protein chinasi, alla famiglia delle protein chinasi Tyr, ed è soggetta a diverse modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione e coniugazione con ubiquitina, che regolano la sua attività e stabilità.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• La sequenza dell'immunogeno (amminoacidi 700-800) si trova al di fuori del dominio chinasi; questo anticorpo può riconoscere sia la FAK a lunghezza completa che l'isoforma FRNK, offrendo flessibilità per la rilevazione dell'espressione totale di FAK.
• In WB, è prevista una banda vicino a 119 kDa; si consiglia di utilizzare controlli appropriati di estrazione proteica e di caricamento per monitorare i livelli di FAK in diversi tipi cellulari o condizioni.
• Per IF/ICC, la FAK si localizza in modo prominente nelle adesioni focali; ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per preservare queste strutture e convalidare la colorazione con controlli adeguati nel proprio sistema di campioni.
• La reattività crociata con campioni di topo e ratto è prevista; verificare le prestazioni nel proprio organismo modello per garantire specificità e sensibilità.
• Le prestazioni dell'anticorpo in ELISA possono richiedere l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e delle condizioni di rilevazione; l'abbinamento con un anticorpo di cattura/rilevazione validato può migliorare il segnale.

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