Anticorpo policlonale coniglio anti-FAM65B per WB, IF-P, ELISA - Q9Y4F9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FAM65B (RIPOR2)

• FAM65B (noto anche come RIPOR2, C6orf32, DIFF48, PL48) è un regolatore della polarizzazione cellulare che interagisce con la famiglia Rho 2 che inibisce la piccola GTPasi RHOA, chiave per la dinamica del citoscheletro.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17150207 PMID:23241886 PMID:24687993
• Promuove la formazione di filopodia e miotubi durante la differenziazione dei mioblasti mononucleari fetali, collegandolo alla miogenesi.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17150207
• Essenziale per l'udito: richiesto per lo sviluppo normale degli stereocilia delle cellule ciliate interne ed esterne della coclea e per il mantenimento del dominio basale degli stereocilia.
  Riferimenti correlati:
  PMID:24958875
• Regola negativamente le risposte dei linfociti T: inibisce l'adesione indotta da chemochine, la polarizzazione e la migrazione, mantenendo i linfociti T naïve quiescenti.
  Riferimenti correlati:
  PMID:23241886 PMID:27556504
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il citoscheletro, i filopodia, la membrana degli stereocilia e la membrana cellulare apicale, coerente con il suo ruolo nelle protrusioni cellulari.
• Espresso nei mioblasti fetali primari, nei linfociti T naïve (alto), nelle cellule T attivate (basso), nelle cellule del sangue, negli organi linfoidi secondari e nel citotrofoblasto.
  Riferimenti correlati:
  PMID:17150207 PMID:27556504 PMID:23241886 PMID:9055809
• Fosfoproteina con splicing alternativo; le mutazioni in RIPOR2 causano sordità non sindromica DFNA21 e DFNB104.
• Parole chiave: adesione cellulare, chemiotassi, sordità, miogenesi, udito, differenziazione, proteina dello sviluppo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di ~119 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. 8% SDS-PAGE) e condizioni di trasferimento umido. Validare il rilevamento con lisati di controllo positivo da tessuti umani, di topo o di ratto che esprimono FAM65B (es. organi linfoidi, cellule muscolari).
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF-P), sono necessari protocolli ottimizzati di fissazione e permeabilizzazione per visualizzare FAM65B nei filopodia, negli stereocilia o nei compartimenti citoplasmatici. Eseguire appropriati controlli di isotipo.
• Per l'ELISA, abbinare a un anticorpo di rilevamento adatto e validare la linearità e la specificità utilizzando la proteina FAM65B ricombinante o lisati cellulari.
• L'anticorpo è stato prodotto contro la regione N-terminale degli aminoacidi 1-210. Poiché lo splicing alternativo può generare isoforme, confermare il pattern delle bande o la localizzazione nel sistema modello mediante controlli di knockdown con siRNA o knockout CRISPR.
• La reattività incrociata è riportata per umano, topo e ratto; l'omologia di sequenza deve essere verificata per altre specie prima dell'uso.

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