Anti-FAP (Fibroblast activation protein-α) Anticorpo Monoclonale Coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - Q12884

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del FAP

• Il FAP è una proteasi di serina multifunzionale di superficie cellulare, nota anche come seprase, che mostra attività sia di endopeptidasi post-prolilica che di dipeptidil peptidasi, con una preferenza per il clivaggio dei substrati dopo i residui di prolina. Riferimenti correlati: PMID:14751930, PMID:16223769, PMID:16410248.
• Degrada la gelatina e il collagene di tipo I denaturato dal calore, contribuendo al rimodellamento della matrice extracellulare (ECM) durante processi come la guarigione delle ferite, la fibrosi e l'invasione tumorale. Riferimenti correlati: PMID:10347120, PMID:10455171, PMID:12376466.
• Il FAP possiede attività di dipeptidil peptidasi, clivando dipeptidi N-terminali dopo la prolina, e può elaborare neuropeptide Y, peptide YY, sostanza P e BNP32 come substrati naturali. Riferimenti correlati: PMID:10347120, PMID:10593948, PMID:16175601, PMID:21314817.
• Localizzato sulla superficie cellulare, in particolare nei lamellipodi, invadopodi e ruffles, il FAP è anche secreto e trovato nel citoplasma, facilitando la proteolisi pericellulare locale.
• È altamente espresso nei fibroblasti stromali reattivi dei carcinomi epiteliali, nel tessuto di granulazione, nei miofibroblasti epatici cirrotici e nelle cellule gliomatosi, ma assente nei tessuti adulti normali, rendendolo un marcatore dei fibroblasti attivati in condizioni patologiche.
• Il FAP promuove la crescita tumorale migliorando l'angiogenesi, degradando le fibre di collagene, sopprimendo le risposte antitumorali delle cellule immunitarie e modulando l'apoptosi, mentre paradossalmente agisce come un soppressore tumorale nelle cellule melanocitiche in modo indipendente dalla proteasi.
• Come glicoproteina con un peso molecolare previsto di ~88/87 kDa (forma completa), il FAP include isoforme derivanti dallo splicing alternativo ed è un membro della famiglia delle proteasi di serina prolyl oligopeptidasi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre il dominio catalitico (aa 411–510), suggerendo che l'anticorpo potrebbe rilevare sia le forme legate alla membrana che solubili del FAP; verificare nel sistema di campione pertinente.
• Per il western blotting, prevedere bande a ~87 kDa (forma completa) e possibilmente a ~26 kDa (isoforma con splicing alternativo o prodotto di clivaggio); utilizzare controlli di carico appropriati e marcatori di peso molecolare.
• Nelle applicazioni IF/ICC, il segnale è previsto alle proiezioni della superficie cellulare (lamellipodi, invadopodi); considerare la permeabilizzazione per migliorare l'accessibilità agli epitopi intracellulari.
• È riportata la reattività crociata con topo e ratto; validare i pattern di colorazione in linee cellulari di fibroblasti attivati o cellule tumorali di queste specie.
• Per l'ELISA, la proteina ricombinante FAP umana o lisati cellulari da linee esprimenti FAP possono fungere da reagenti di cattura; abbinare a un anticorpo di rilevamento compatibile se si sviluppa un saggio sandwich.

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