Anticorpo monoclonale anti-FAP per citometria a flusso - Q12884

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di FAP

• La peptidasi endopeptidica della prolina FAP (proteina alfa di attivazione dei fibroblasti, nota anche come seprasi) è una proteasi serinica glicoproteica di superficie cellulare coinvolta nella degradazione della matrice extracellulare (ECM), contribuendo al rimodellamento tissutale, alla fibrosi, alla guarigione delle ferite, all'infiammazione e alla crescita tumorale. Presenta un'attività endopeptidasica con scissione dopo la prolina, con preferenza per le sequenze consenso Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala presenti in substrati come SERPINF2 e SPRY2. Riferimenti correlati: PMID:14751930 PMID:16223769 PMID:16410248

• FAP degrada la gelatina e il collagene di tipo I denaturato dal calore, ma non i collagene nativi di tipo I e IV, la vitronectina, la tenascina, la laminina, la fibronectina, la fibrina o la caseina. Riferimenti correlati: PMID:10347120 PMID:10455171 PMID:12376466

• L'enzima possiede anche un'attività dipeptidil-peptidasica, scindendo i dipeptidi N-terminali in cui il residuo penultimo è la prolina, con preferenza per Ala-Pro, Ile-Pro, Gly-Pro, Arg-Pro e Pro-Pro. Riferimenti correlati: PMID:10347120 PMID:10593948 PMID:16175601

• I substrati naturali dell'attività dipeptidil-peptidasica includono il neuropeptide Y, il peptide YY, la sostanza P e il peptide natriuretico cerebrale 32. Riferimenti correlati: PMID:21314817

• La forma di FAP presente sulla membrana plasmatica, in associazione con DPP4, PLAUR o le integrine, promuove la proteolisi pericellulare, l'adesione cellulare, la migrazione e l'invasione, potenziando così la progressione tumorale, l'angiogenesi e l'evasione immunitaria.

• FAP è localizzata sulla superficie cellulare, nella membrana, nelle lamellipodie, nelle invadopodie e nelle increspature della membrana; viene inoltre secreta ed è presente nel citoplasma. È altamente espressa nei fibroblasti attivati delle ferite in guarigione, dello stroma tumorale, del fegato cirrotico e del tessuto adiposo, con espressione specifica per isoforma nelle linee cellulari di melanoma, carcinoma e fibroblasti.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il tipo cellulare e le condizioni sperimentali specifici.
• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare (aa 26-760); pertanto, l'anticorpo può rilevare sia la FAP legata alla membrana sia quella solubile. Validare la specificità della rilevazione nel proprio sistema di analisi.
• Utilizzare controlli isotipici appropriati e fissare/permeabilizzare le cellule se è necessaria una colorazione intracellulare.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo in campioni umani pertinenti (ad esempio, fibroblasti attivati e linee cellulari tumorali), poiché la reattività crociata è limitata all'uomo.

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