Anticorpo Policlonale Anti-Fas di Coniglio per WB, ELISA - P25445

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Fas

• Fas, noto anche come CD95, APO-1 e TNFRSF6, è un membro della superfamiglia dei recettori del fattore di necrosi tumorale e un mediatore critico dell'apoptosi.
• Funziona come recettore per FASLG (ligando di Fas), formando il complesso di segnalazione che induce la morte (DISC) tramite il reclutamento di FADD, che attiva la caspasi-8 e la cascata di caspasi a valle per eseguire l'apoptosi.
• L'isoforma 1 a lunghezza intera (legata alla membrana) innesca l'apoptosi, mentre le isoforme secrete 2–6 prodotte da splicing alternativo agiscono come recettori esca che bloccano l'apoptosi mediata da FASLG in vitro.
• Fas è localizzato principalmente sulla membrana cellulare, inclusi i raft di membrana, ma le isoforme secrete sono rilevate anche a livello extracellulare.
• Le principali modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, palmitoilazione e fosforilazione, che ne regolano il traffico di membrana e la segnalazione.
• Nei monociti nucleati del sangue periferico (PBMC) a riposo, l'isoforma 1 e l'isoforma 6 sono espresse a livelli uguali; dopo l'attivazione, l'isoforma 1 aumenta mentre l'isoforma 6 diminuisce, suggerendo un interruttore regolatorio.
• L'apoptosi mediata da Fas è essenziale per la tolleranza periferica e la morte cellulare indotta dall'attivazione dei linfociti T maturi, sottolineando il suo ruolo nell'omeostasi immunitaria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 200–300 all'interno del dominio extracellulare del Fas umano. Questa regione è conservata tra uomo, topo e ratto, supportando la reattività crociata.
• Per il Western blot, possono essere osservate multiple bande tra 9–38 kDa a causa dello splicing alternativo, della glicosilazione e del rilascio dalla membrana. Convalidare la specificità della banda utilizzando controlli appropriati.
• Quando si esegue l'ELISA, considerare l'uso del frammento ricombinante di Fas come controllo positivo e pre-incubare l'anticorpo con l'immunogeno per confermare la specificità.
• Per studi che coinvolgono l'attivazione delle cellule immunitarie, notare che l'espressione delle isoforme di Fas cambia dopo la stimolazione, quindi tempistica e tipo cellulare sono critici per la rilevazione.

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