Anticorpo monoclonale anti-FAT10/UBD per WB e ELISA - O15205

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FAT10/UBD

• FAT10/UBD (Ubiquitina D), noto anche come diubiquitina, è una proteina simile all'ubiquitina che funge da modificatore covalente che targeting i substrati per la degradazione del proteasoma 26S in modo dipendente da NUB1. La coniugazione è mediata dall'enzima E1 UBA6. Riferimenti correlati: PMID:15831455 PMID:16707496 PMID:19166848 PMID:17889673 PMID:35970836
• Regola positivamente la segnalazione NF-κB promuovendo la degradazione proteasomica indotta da TNF dell'IκBα ubiquitinato. Riferimenti correlati: PMID:19959714
• FAT10 contribuisce all'instabilità cromosomica accorciando la mitosi e compromettendo la localizzazione al cinetocoro di MAD2L1 durante la prometafase. Riferimenti correlati: PMID:16495226
• Promuove l'apoptosi dipendente da caspasi, in particolare nelle cellule epiteliali renali, ed è implicato nella malattia renale policistica e nella nefropatia associata all'HIV. Riferimenti correlati: PMID:16495380
• FAT10 è coinvolto nella maturazione delle cellule dendritiche, facilitando la transizione delle DC immaturre in cellule presentanti l'antigene pienamente competenti. Riferimenti correlati: PMID:19028597
• In condizioni di stress proteotossico, FAT10 può facilitare la formazione di aggresomi quando la capacità del proteasoma è superata. Riferimenti correlati: PMID:19033385
• Upregola l'espressione della subunità dell'immunoproteasoma PSMB9/LMP2.
• A livello subcellulare, FAT10 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma.
• È espresso costitutivamente nelle cellule dendritiche mature e nelle cellule B, con i liveli più alti nei tessuti linfoide, tratto gastrointestinale, rene, polmato e prostata.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico che copre gli aminoacidi 70–150 del FAT10/UBD umano. Considerare l'utilizzo di questo design specifico per la regione per minimizzare la reattività crociata con altre proteine simili all'ubiquitina.
• Per il Western blot, testare su lisati cellulari totali da linee cellulari note per esprimere FAT10, come linee cellulari umane di cellule B o cellule dendritiche, o dopo stimolazione con TNF/LPS per indurre l'espressione endogena. Possono essere utilizzate anche linee cellulari di topo data la confermata reattività crociata.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può fungere da reagente di cattura o di rilevamento per la quantificazione dei livelli di FAT10. Validare le condizioni dell'analisi con la proteina FAT10 ricombinante o estratti cellulari.
• Dato che FAT10 può formare coniugati e può apparire a pesi molecolari più elevati, considerare l'esecuzione dei campelli con agenti riducenti e il monitoraggio delle specie ubiquitinate nel WB.

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