Anticorpo policlonale coniglio anti-Fatty Acid Synthase (FASN) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49327

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Fatty Acid Synthase (FASN)

• La sintasi degli acidi grassi è una proteina multi-enzimatica che catalizza la biosintesi de novo del palmitato, un acido grasso saturo a catena lunga, a partire da acetil-CoA e malonil-CoA in presenza di NADPH. Possiede sette distinte attività catalitiche e un sito di legame per il gruppo prostetico 4'-fosfopanteteina (dominio proteico vettore acile).
• L'enzima svolge un ruolo centrale nella biosintesi dei lipidi ed è essenziale per la sintesi delle membrane e per l'accumulo di energia. La sua attività è strettamente legata agli stati metabolici cellulari ed è frequentemente sovraregolata nel cancro e nei disturbi metabolici.
• La FASN si localizza prevalentemente nel citoplasma ed è stata rilevata anche nei melanosomi, dove la sua attività contribuisce alla sintesi della melanina.
• È espressa in modo ubiquitario, con livelli particolarmente elevati nel cervello, nel polmone, nel fegato e nella ghiandola mammaria, riflettendo la sua importanza nei tessuti lipogenici.
• La proteina è soggetta a molteplici modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione, S-nitrosilazione e ubiquitinilazione, che regolano la sua attività, stabilità e distribuzione subcellulare.
• Durante l'infezione, l'attività della FASN è necessaria per la replicazione del SARS-CoV-2, evidenziando un potenziale punto di intervento terapeutico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• A causa dell'elevato peso molecolare della FASN (~273 kDa), considerare l'uso di gel SDS-PAGE a bassa percentuale (es. 6% o gel a gradiente) e tempi di trasferimento a umido prolungati per il Western blotting. Si consiglia un marcatore pre-colorato ad alto peso molecolare.
• Per immunochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC), potrebbe essere necessaria il recupero dell'antigene con tampone citrato (pH 6,0) o tampone EDTA (pH 9,0). Verificare le condizioni ottimali nei modelli di tessuto e linea cellulare.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare l'immunogeno ricombinante come controllo positivo. Titolare sia gli anticorpi di cattura che quelli di rilevamento per stabilire le concentrazioni di lavoro.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con la FASN di topo e ratto, suggerendo una conservazione dell'epitopo immunogenico; tuttavia, le prestazioni in ogni specie devono essere validate nel sistema di campione pertinente.

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