Anticorpo policlonale anti-FBXL5 per WB, ELISA - Q9UKA1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FBXL5

• FBXL5 (proteina 5 con ripetizioni F-box/LRR) è un componente del complesso ligasi E3 ubiquitina-proteica SCF (SKP1-cullin-F-box). Regola l'omeostasi del ferro mirando IREB2/IRP2 per l'ubiquitinazione e la degradazione. Riferimenti correlati: PMID:19762596, PMID:19762597
• Il dominio N-terminale simile all'emeritrina (Hr) contiene un centro metallico di-ferro che agisce come sensore di ferro. In condizioni di basso ferro, FBXL5 è instabile; il legame del ferro stabilizza la proteina. Riferimenti correlati: PMID:19762596, PMID:19762597
• Il dominio C-terminale contiene un cluster [2Fe-2S] sensibile ai redox, che, dopo l'ossidazione, consente a FBXL5 di reclutare IRP2 per la degradazione in modo dipendente dall'ossigeno. Riferimenti correlati: PMID:32126207
• FBXL5 ubiquitina anche il componente DCTN1 del complesso dinactina, promuovendone la degradazione. Riferimenti correlati: PMID:17532294
• Nel nucleo, FBXL5 ubiquitina il fattore di trascrizione SNAI1, impedendone il legame al DNA e promuovendone la degradazione. Riferimenti correlati: PMID:24157836
• FBXL5 regola negativamente la risposta al danno del DNA mediando la degradazione della proteina di riparazione del DNA NABP2. Riferimenti correlati: PMID:25249620
• Si localizza principalmente nel citoplasma e nella regione perinucleare, ma transita anche nel nucleo. I suoi domini includono ripetizioni ricche di leucina e cluster ferro-zolfo.
• Lo splicing alternativo produce multiple isoforme, come indicato dall'identificazione proteomica e dai dati del proteoma di riferimento.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1–310, corrispondenti ai domini N-terminale simile all'emeritrina e F-box, che sono conservati evolutivamente nell'uomo, nel topo e nel ratto. Questa regione è probabilmente responsabile della reattività crociata osservata.
• Per il western blotting (WB), considerare il peso molecolare teorico di circa 79 kDa (UniProt) o i 79 kDa riportati dal fornitore. Confermare la dimensione della banda nella specifica matrice campione e validare la specificità del segnale utilizzando controlli appropriati (es. lisati di knockdown o knockout).
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale può consentire il rilevamento sia della proteina bersaglio nativa che denaturata. Ottimizzare empiricamente le condizioni di rivestimento e di rilevamento.
• Si noti che FBXL5 subisce splicing alternativo; pertanto, potrebbero essere rilevate multiple bande in WB. Validare il profilo di reattività dell'anticorpo nel tessuto o linea cellulare pertinente.
• Come per qualsiasi anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata e raccomandiamo test di pre-adsorbimento se è richiesta un'elevata specificità per il test.

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