Anticorpo Policlonale Anti-FCAR per WB, IF/ICC, ELISA - P24071

Specifiche e Parametri Core del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FCAR (CD89)

• FCAR, anche noto come CD89, è una glicoproteina transmembrana di tipo I e il recettore per l'immunoglobulina alfa (IgA), appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline.
• La proteina media funzioni effettrici immunitarie come la produzione di citochine, la fagocitosi e la degranulazione dopo il legame con i complessi immuni di IgA.
• FCAR è espresso in modo differenziale nelle cellule mieloidi: i monociti esprimono tutte e tre le principali isoforme (A.1, A.2, A.3), mentre i macrofagi alveolari esprimono tipicamente solo una isoforma di superficie.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare; inoltre, le forme secrete possono essere generate tramite splicing alternativo o distacco proteolitico.
• Le caratteristiche strutturali chiave comprendono due domini extracellulari simili alle immunoglobuline, una singola elica transmembrana e una coda citoplasmatica corta priva di motivi di segnalazione classici; la segnalazione avviene tramite associazione con la catena γ comune dei recettori Fc.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked in più siti e la formazione di legami disolfuro, che contribuiscono alla stabilità e al legame con il ligando.
• Gli studi funzionali implicano FCAR sia nell'immunità sistemica sia in quella mucosale, con ruoli nelle risposte infiammatorie e nella regolazione dell'omeostasi immunitaria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 60-287), che è previsto essere ben esposto per la rivelazione. Per il Western blot, considera che il peso molecolare osservato potrebbe essere maggiore (~45-65 kDa) a causa della glicosilazione.
• Per IF/ICC, usa la permeabilizzazione se stai bersagliando la coda citoplasmatica o se l'isoforma è prevalentemente intracellulare; per la colorazione di superficie, può essere fattibile l'etichettatura di cellule vive con l'anticorpo.
• Poiché FCAR è espresso nelle cellule mieloidi primarie, i campioni di controllo positivi rilevanti includono le cellule mononucleate del sangue periferico umano (PBMC) o i lisati di milza di topo.
• Le applicazioni ELISA possono essere ottimizzate utilizzando proteine di fusione ricombinanti FCAR-Fc come cattura/standard; nota che l'anticorpo rileva sia le forme legate alla membrana sia quelle solubili.
• La reattività crociata con il topo è riportata; tuttavia, l'omologia di sequenza nel dominio extracellulare è solo del 50% circa, quindi valida la reattività nel tuo ceppo e tessuto di topo specifico.

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