Anticorpo policlonale rabbit Anti-FCGR2B per WB, IF-P, ELISA - P31994

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FCGR2B

• FCGR2B, noto anche come CD32, FcγRIIB o CD32B, è un recettore a bassa affinità per la regione Fc dell'immunoglobulina gamma (IgG) complessata o aggregata. È un membro della superfamiglia delle immunoglobuline.
• Il recettore esiste in diverse isoforme (ad esempio IIB1 e IIB2) prodotte mediante splicing alternativo. L'isoforma IIB1 non possiede i motivi per l'endocitosi e la fagocitosi, mentre l'isoforma IIB2 non innesca la fagocitosi dopo il legame con il ligando.
• FCGR2B svolge un ruolo immunoregolatore chiave down-modulando l'attivazione cellulare triggerata dai recettori delle cellule B (BCR), dai recettori delle cellule T (TCR) o da altri recettori Fc, influenzando così la produzione di anticorpi e la gestione dei complessi immuni.
• È localizzato principalmente sulla membrana cellulare come proteina transmembrana di tipo I a singolo passaggio, con una regione extracellulare contenente due domini simili alle immunoglobuline, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica.
• La proteina è ampiamente distribuita tra le linee mieloidi e linfoidi, tra cui monociti, neutrofili, macrofagi, basofili, eosinofili, cellule di Langerhans, cellule B, piastrine e cellule endoteliali placentari. Non è rilevabile sulle cellule natural killer.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione N-linked, formazione di ponti disolfuro e fosforilazione, che regolano la sua attività e le sue interazioni.
• Variazioni genetiche e riarrangiamenti cromosomici che coinvolgono FCGR2B sono stati associati a patologie autoimmuni come il lupus eritematoso sistemico (LES).
• Inoltre, FCGR2B agisce come proto-oncogene e è stato implicato nelle interazioni ospite-virus, evidenziando il suo ruolo multifaccettato nell'immunità e nelle malattie.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 43–217 all'interno del dominio extracellulare, bersagliando una regione critica per il legame con il ligando; consigliamo di verificare l'accessibilità dell'epitopo in condizioni native rispetto a denaturate per applicazioni come IF-P rispetto a WB.
• Per il western blotting, il peso molecolare previsto è ~34 kDa, ma le bande effettive possono spostarsi a causa della glicosilazione; includi controlli positivi e negativi appropriati nella progettazione del tuo esperimento.
• Nell'immunofluorescenza su sezioni incluse in paraffina (IF-P), ottimizza i passaggi di recupero dell'antigene e permeabilizzazione per garantire la rilevazione della proteina legata alla membrana.
• Quando esegui l'ELISA, valuta la reattività incrociata con altri membri della famiglia FcγR e convalida la specificità nella matrice di campione pertinente (ad esempio siero, lisati cellulari).
• Data l'ampia reattività incrociata con uomo, topo e ratto, conferma i profili di reattività specifici per specie nel tuo sistema di analisi, specialmente quando analizzi target a bassa abbondanza.
• Trattandosi di un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere monitorata; raccomandiamo di testare ogni nuovo lotto in uno studio pilota prima di esperimenti su larga scala.

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