Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-FCN1 per WB ed ELISA - O00602

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Ficolina-1

• La Ficolina-1 (conosciuta anche come M-ficolina, ficolina-A, ficolina-alfa) è una lectina simile al collagene secreta di 35 kDa codificata dal gene FCN1 (GeneID: 2219) appartenente alla famiglia delle ficoline, molecole di riconoscimento di pattern.
• Agisce come recettore di riconoscimento di pattern che lega strutture carboidratiche specifiche sulle superfici dei patogeni per avviare la via lectinica del complemento tramite l'attivazione della serina proteasi MASP1, portando alla fagocitosi del patogeno e alla segnalazione immunitaria adattativa. Riferimenti correlati: PMID:16116205, PMID:17897951, PMID:20032467
• Riconosce preferenzialmente derivati dell'acido sialico 9-O-acetilato con legami 2-6 e glicani contenenti acido sialico con legami 2-3. Riferimenti correlati: PMID:20032467, PMID:20400674
• Può anche attivare i monociti attraverso il recettore accoppiato a proteina G FFAR2, inducendo la secrezione di interleuchina-8/IL-8. Riferimenti correlati: PMID:21037097
• Localizzata come proteina secreta e ancorata sulla superficie cellulare delle cellule immunitarie.
• Esressa nei leucociti del sangue periferico, monociti e granulociti; rilevata anche in milza, polmone e timo (attribuita ai macrofagi tissutali). Non trovata sui linfociti.
• Contiene una regione simile al collagene e un dominio lectinico simile al fibrinogeno; il legame calcio-dipendente e la formazione di ponti disolfuro contribuiscono alla sua oligomerizzazione e integrità strutturale (struttura 3D risolta; identificazione proteomica; proteoma di riferimento; peptide segnale).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 30–326, comprendendo quasi l'intera lunghezza di FCN1; l'anticorpo policlonale risultante dovrebbe riconoscere multipli epitopi, fornendo un segnale robusto sia in condizioni denaturanti (WB) che native (ELISA).
• Per il Western blot, ridurre i campioni con DTT/β-mercaptoetanolo per rilevare la forma monomerica di 35 kDa; notare che oligomeri legati da ponti disolfuro possono apparire a pesi molecolari più alti in condizioni non riducenti.
• Convalidare la specificità in campioni noti per esprimere FCN1 (es. cellule mononucleate del sangue periferico umano, linee monocitiche U937 o THP-1) e utilizzare un controllo negativo (linfociti o knockdown) per confermare la banda di interesse.
• In ELISA, eseguire titolazioni a scacchiera utilizzando ficolina-1 ricombinante o siero per ottimizzare le concentrazioni dell'anticorpo di rivestimento e di rilevamento; considerare di testare l'anticorpo sia come componente di cattura che di rilevamento.
• Quando si utilizzano campioni di topo o ratto, verificare la reattività con controlli positivi specie-specifici, poiché l'omologia di sequenza è ~80% ma il riconoscimento dell'epitopo può variare.
• Raccogliere il sangue e preparare siero/plasma in condizioni che prevengano l'attivazione non intenzionale del complemento per evitare consumo proteico o formazione di complessi.
• La consistenza tra lotti può differire tra gli anticorpi policlonali; richiedere campioni di ritenzione o eseguire uno studio di ponte se si cambia lotto per saggi critici.

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