Anticorpo policlonale Anti-FEN-1 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P39748

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FEN-1

• FEN-1 (Flap endonuclease 1), noto anche come DNasi IV, MF1 o RAD2, è una nucleasi specifica per la struttura con attività sia di 5'-flap endonucleasi che di 5'-3' esonucleasi.
• Svolge un ruolo critico nella replicazione del DNA clivando le strutture a lembo 5'-sospese generate durante la lavorazione dei frammenti di Okazaki, lasciando un'interruzione per la ligazione.
• Partecipa alla via di riparazione per escissione di basi a tratto lungo (LP-BER), clivando all'interno dei lembi terminati dal sito AP.
• Agisce come fattore di stabilizzazione del genoma impedendo che i lembi si equilibrino in strutture che potrebbero causare duplicazioni e delezioni.
• Presenta anche attività di 5'-3' esonucleasi su DNA a doppio filamento con rotture o spazi vuoti e possiede attività di RNasi H.
• È coinvolto nella replicazione e riparazione del DNA ribosomiale (rDNA) e del DNA mitocondriale.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare, incluso il nucleolo e il nucleoplasma, ma è stata riportata anche una localizzazione mitocondriale.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, metilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua funzione e le sue interazioni.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 50-380 di FEN-1 umano, coprendo la maggior parte della proteina, il che può contribuire al riconoscimento di più epitopi.
• Per Western blot (WB), attendere una banda a circa 43 kDa; considerare l'utilizzo di lisati cellulari totali da linee cellulari umane o murine.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), è prevista la colorazione nucleare, ma si può osservare anche la localizzazione mitocondriale; ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione.
• Nell'immunoprecipitazione (IP) e nell'ELISA, la natura policlonale può aumentare l'efficienza di cattura; convalidare con controlli positivi e negativi appropriati.
• La reattività crociata con il topo è stata confermata; per altre specie, eseguire l'allineamento delle sequenze e la convalida sperimentale prima dell'uso.
• Conservare a -20°C come consigliato per la stabilità a lungo termine; evitare cicli ripetuti di congelamento e scongelamento.

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