Anticorpo policlonale anti-FGD1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P98174

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di FGD1

• FGD1 (proteina 1 contenente i domini FYVE, RhoGEF e PH), nota anche come proteina 1 della displasia faciogenitale o ZFYVE3, è un fattore di scambio dei nucleotidi della guanina (GEF) per la piccola GTPasi CDC42.
• Catalizzando lo scambio di GDP con GTP, attiva CDC42, regolando così il citoscheletro di actina e la forma cellulare, nonché la formazione di proiezioni cellulari come lamellipodi e increspature della membrana.
• La proteina contiene i domini FYVE, RhoGEF (DH) e PH; il dominio FYVE si lega al fosfatidilinositolo 3-fosfato, mentre il modulo DH-PH media l'attività di scambio nucleotidico.
• FGD1 si localizza nel citoplasma e si associa al citoscheletro, in particolare a livello di lamellipodi e increspature della membrana, coerentemente con il suo ruolo nel rimodellamento del citoscheletro.
• È espressa nel cuore fetale, nel cervello, nei polmoni, nei reni e nella placenta, con livelli inferiori nei tessuti adulti, inclusi cuore, cervello, polmoni, pancreas e muscolo scheletrico.
• Espressa ubiquitariamente e fosforilata, FGD1 è classificata con parole chiave tra cui Proiezione cellulare, Citoplasma, Citoscheletro e Fattore di rilascio dei nucleotidi della guanina.
• Le mutazioni in FGD1 causano la displasia faciogenitale (sindrome di Aarskog-Scott), una patologia legata al cromosoma X caratterizzata da anomalie craniofacciali, scheletriche e urogenitali.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza compresa tra gli amminoacidi 700-800 di FGD1 umano; allineare questa regione con gli ortologhi di topo e ratto per confermare la conservazione dell'epitopo e la reattività crociata prevista.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 107 kDa; ottimizzare le condizioni di corsa e trasferimento per le proteine di grandi dimensioni e convalidare la specificità della banda utilizzando controlli positivi appropriati.
• Nell'IHC-P e nell'IF/ICC, considerare che FGD1 si localizza nel citoplasma e nel citoscheletro; i protocolli di permeabilizzazione e fissazione devono essere adeguati di conseguenza e il segnale può risultare arricchito a livello di lamellipodi e increspature della membrana.
• ELISA: determinare la concentrazione ottimale di rivestimento dell'anticorpo o dell'antigene per i formati indiretto o sandwich e includere una convalida appropriata con proteina ricombinante o lisati cellulari.

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