Anticorpo Policlonale Anti-FH (Fumarato Idratasi) per WB, ELISA - P07954

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FH (Fumarato Idratasi)

• FH catalizza l'idratazione reversibile del fumarato in L-malato nel ciclo di Krebs, un passaggio chiave nella produzione di energia mitocondriale (PubMed:30761759). Riferimenti correlati: PMID:30761759

• Le isoforme citosoliche di FH partecipano al ciclo dell'urea e al metabolismo dell'arginina, producendo fumarato come sottoprodotto (Per somiglianza).

• FH è annotato come una proteina soppressore tumorale e variante di malattia; le mutazioni sono associate a sindromi tumorali ereditarie come l'HLRCC.

• In risposta al danno al DNA, FH viene fosforilata da PRKDC e si trasloca nel nucleo, dove promuove la riparazione NHEJ inibendo la demetilasi KDM2B, portando a un aumento di H3K36me2 nei DSB (PubMed:20231875, PubMed:26237645). Riferimenti correlati: PMID:20231875, PMID:26237645

• FH si localizza principalmente nei mitocondri ma anche nel citosol; l'accumulo nucleare avviene dopo danno al DNA (PubMed:26237645).

• L'inizio alternativo produce diverse isoforme che possono favorire reazioni di idratazione o disidratazione (Probabile).

• FH è espressa nei globuli rossi ed è sottoespressa in pazienti con anemia emolitica ereditaria non sferocitica di eziologia sconosciuta.

• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione; la fosforilazione mediata da PRKDC nei DSB è critica per il suo ruolo nella riparazione del DNA.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 50–150 di FH umano; considerare l'uso di controlli positivi come lisati di HeLa o HEK293T per il WB.
• Per il Western blot, dovrebbe essere osservata una banda specifica a ~55 kDa; utilizzare appropriati controlli di caricamento e marcatori di peso molecolare.
• La frazionamento subcellulare può migliorare il rilevamento dei pool mitocondriali o nucleari di FH.
• Per l'ELISA, ottimizzare l'antigene di rivestimento e la titolazione dell'anticorpo per ottenere i migliori rapporti segnale/rumore.
• La reattività incrociata con FH di topo e ratto consente studi multispiecie; validare nel proprio sistema sperimentale.
• La pre-adsorbimento con il peptide immunizzante può confermare la specificità della banda.

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