Anticorpo Policlonale Anti-FH (Fumarato Idratasi) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P07954

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Fumarato Idratasi

• FH catalizza l'interconversione reversibile stereospecifica del fumarato in L-malato, una reazione centrale per la produzione di energia mitocondriale e le vie metaboliche citosoliche. Riferimenti correlati: PMID:30761759
• Nel ciclo dell'acido tricarbossilico (TCA) mitocondriale, FH idrata il fumarato in L-malato, contribuendo alla generazione di NADH. Nel citosol, disidrata l'L-malato a fumarato, supportando il ciclo dell'urea e il catabolismo dell'arginina.
• L'inizio alternativo della traduzione produce isoforme mitocondriali e citosoliche, che potrebbero mostrare preferenze catalitiche opposte secondo evidenze in altre specie (Probabile).
• FH partecipa alla riparazione delle rotture del doppio filamento del DNA traslocando nel nucleo dopo il danno al DNA e promuovendo la giunzione delle estremità non omologhe (NHEJ). Catalizza la formazione di fumarato, che inibisce l'istone demetilasi KDM2B, portando ad un aumento di H3K36me2 e facilitando l'assemblaggio delle proteine di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:20231875 PMID:26237645
• La localizzazione subcellulare comprende mitocondri, citoplasma, nucleo e cromosoma; l'accumulo nucleare è indotto da stress genotossico e fosforilazione da PRKDC.
• FH agisce come soppressore tumorale; mutazioni germinali sono associate a leiomiomatosi ereditaria e carcinoma a cellule renali (HLRCC) e a carenza di fumarato idratasi.
• Modificazioni post-traduzionali, inclusa acetilazione e fosforilazione, regolano l'attività di FH e il suo traffico intracellulare.
• FH è espresso nei globuli rossi, e livelli citoplasmatici ridotti sono stati osservati in pazienti con anemia emolitica ereditaria non sferocitica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 45–510 di FH umano, comprendendo la maggior parte della sequenza proteica. Questo design probabilmente rileva sia le isoforme mitocondriali che citosoliche.
• Per l'analisi Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 55 kDa. Possono apparire bande multiple a causa di differenze isoformiche o modificazioni post-traduzionali; validare la specificità utilizzando controlli appropriati.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare i protocolli di recupero dell'antigene e fissazione. Sono raccomandati controlli tissutali positivi e negativi che esprimono FH a livelli noti.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare l'uso della proteina FH ricombinante come standard per saggi quantitativi e verificare la reattività crociata con proteine omologhe di altre specie.

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