Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fibroblast activation protein-α (FAP) per WB, IF/ICC, ELISA - Q12884

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Fibroblast Activation Protein Alpha (FAP)

• FAP, nota anche come seprasi e SIMP, è una glicoproteina serin proteasi di superficie cellulare.
• Le sue attività endopeptidasica e dipeptidil peptidasi hanno come substrati alfa-2-antiplasmina, SPRY2 e neuropeptidi (NPY, PYY, sostanza P), con preferenza per sequenze consenso Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala.
  Riferimenti correlati: PMID:14751930, PMID:16223769, PMID:16410248, PMID:10347120, PMID:10593948, PMID:16175601, PMID:21314817
• FAP degrada gelatina e collagene di tipo I denaturato dal calore, facilitando l'adesione, la migrazione e l'invasione cellulare durante il rimodellamento tissutale.
  Riferimenti correlati: PMID:10347120, PMID:10455171, PMID:12376466
• Nei tumori, FAP promuove l'invasione del glioma degradando la brevican e potenzia l'angiogenesi, la degradazione del collagene e l'evasione immunitaria, sostenendo la progressione maligna.
• A livello subcellulare, FAP si trova sulla membrana cellulare, nei lamellipodi, negli invadopodi e nelle ruffles; può anche essere secreta o presente nel citoplasma.
• L'espressione tissutale è limitata ai fibroblasti attivati (es. guarigione ferite, stroma tumorale, fegato cirrotico), cellule di glioma e tessuto adiposo, ma è assente nel fegato normale.
• Il gene FAP produce almeno due isoforme tramite splicing alternativo, entrambe espresse in linee cellulari di melanoma, carcinoma e fibroblasti.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, il peso molecolare previsto di FAP è ~88 kDa; utilizzare percentuali di gel appropriate (es. SDS-PAGE 8–10%) e confermare la specificità della banda con controlli rilevanti.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, i passaggi di permeabilizzazione sono essenziali per rilevare FAP localizzata sulla membrana; convalidare la colorazione in linee cellulari positive come fibroblasti attivati o cellule tumorali.
• Per applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può fungere da reagente di cattura o di rilevamento; si consiglia l'ottimizzazione dell'abbinamento e un appropriato blocco.
• Data la natura policlonale e l'immunogeno quasi a lunghezza completa, l'anticorpo riconosce probabilmente epitopi multipli, il che può essere vantaggioso per rilevare varianti in umano, topo e ratto.
• Verificare la reattività crociata con campioni di topo e ratto utilizzando controlli positivi specie-specifici, poiché i livelli di espressione possono variare.
• Considerare che FAP solubile è presente in alcuni fluidi biologici, il che potrebbe competere con le forme legate alla membrana in determinati saggi.

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