Anticorpo policlonale anti-FIG4 per WB, ELISA - Q92562

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FIG4

• FIG4, noto anche come SAC3 o KIAA0274, è una fosfatasi polifosfoinositidica e un componente centrale del complesso regolatore del PI(3,5)P2, cruciale per il metabolismo dei fosfatidilinositoli e la segnalazione endolisosomiale.
• Funziona come una fosfatasi a doppia specificità: catalizza la defosforilazione di PtdIns(3,5)P2 per generare PtdIns(3)P, e agisce anche come una serina-proteina fosfatasi su PIKfyve per stimolare la sua attività lipidica chinasi, regolando così i livelli di PtdIns(3,5)P2. Riferimenti correlati: PMID:17556371 PMID:33098764
• La proteina si localizza prevalentemente sulla membrana dell'endosoma, coerentemente con il suo ruolo nella regolazione dei pool di fosfoinositidi endosomiali.
• Mutazioni nel gene FIG4 sono collegate a gravi malattie neurodegenerative, tra cui la sclerosi laterale amiotrofica di tipo 11 (ALS11) e la malattia di Charcot-Marie-Tooth di tipo 4J (CMT4J), rendendola un bersaglio clinicamente significativo.
• In vitro, FIG4 può anche idrolizzare altri polifosfoinositidi fosforilati in D5 come PtdIns(3,4,5)P3 e PtdIns(4,5)P2, sebbene con minore preferenza rispetto a PtdIns(3,5)P2. Riferimenti correlati: PMID:17556371
• Il peso molecolare di FIG4 umano è di circa 104 kDa (103.635 Da basato sulla sequenza), in linea con l'architettura complessa del dominio della proteina.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per il Western blot, utilizzare lisati cellulari interi da campioni umani o murini (ad es. HeLa, NIH/3T3) a causa della reattività crociata confermata dell'anticorpo con queste specie.
• Titolare la concentrazione dell'anticorpo per ogni applicazione; un intervallo di diluizione tipico per gli anticorpi policlonali è 1:500–1:2000 per WB e 1:1000–1:5000 per ELISA indiretto, ma le condizioni ottimali devono essere determinate empiricamente.
• L'immunogeno copre il dominio C-terminale (aa 608–907), quindi l'anticorpo dovrebbe rilevare FIG4 a lunghezza intera insieme alle isoforme pertinenti.
• Poiché FIG4 è una proteina associata agli endosomi, la frazionazione subcellulare o l'arricchimento delle proteine di membrana possono migliorare la sensibilità di rilevamento in WB.

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