Anticorpo policlonale di coniglio anti-FLCN per WB, IF/ICC, ELISA - Q8NFG4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della folliculina

• FLCN è una proteina multifunzionale codificata dal gene FLCN, nota anche come proteina BHD (sindrome di Birt-Hogg-Dubé), e agisce come soppressore tumorale.
• Funziona come proteina attivatrice della GTPasi (GAP) per RagC/RRAGC e RagD/RRAGD, stimolando l'idrolisi del GTP per attivare mTORC1 in risposta alla disponibilità di amminoacidi. Riferimenti correlati: PMID:24095279 PMID:31672913 PMID:31704029
• FLCN svolge un ruolo chiave nella via di segnalazione non canonica di mTORC1, controllando la localizzazione subcellulare dei fattori di trascrizione MiT/TFE TFEB e TFE3 e regolando così la biogenesi lisosomiale e l'autofagia. Riferimenti correlati: PMID:17028174 PMID:18663353 PMID:21209915 PMID:24081491 PMID:31672913
• In condizioni di bassa disponibilità di amminoacidi, il complesso della folliculina lisosomiale (LFC) inibisce l'attività GAP di FLCN, determinando l'inattivazione di mTORC1 e la traslocazione nucleare di TFEB/TFE3; dopo la restimolazione con amminoacidi, il complesso si dissocia, ripristinando l'attivazione di mTORC1. Riferimenti correlati: PMID:31672913 PMID:32612235
• FLCN agisce indirettamente come regolatore positivo della segnalazione Wnt promuovendo la ritenzione citoplasmatica di TFE3 dipendente da mTOR ed è necessaria per l'uscita delle cellule staminali ematopoietiche dalla pluripotenza. Riferimenti correlati: PMID:31272105 PMID:30733432
• Regola la glicolisi legandosi alla lattato deidrogenasi LDHA e agendo come inibitore incompetitivo. Riferimenti correlati: PMID:34381247
• In risposta allo stress da flusso, FLCN regola l'accumulo di STK11/LKB1 e l'attivazione di mTORC1 attraverso i cigli primari, reclutando STK11/LKB1 nei cigli per l'attivazione di AMPK. Riferimenti correlati: PMID:27072130
• Dopo la fosforilazione da parte di ULK1, FLCN interagisce con GABARAP e promuove l'autofagia; è inoltre necessaria per il raggruppamento perinucleare dei lisosomi indotto dalla privazione di nutrienti attraverso RILP-RAB34. Riferimenti correlati: PMID:25126726 PMID:27113757
• La localizzazione subcellulare comprende la membrana lisosomiale, il citosol, il ciglio primario, il centrosoma, il fuso mitotico e il nucleo. È espressa nella maggior parte dei tessuti, inclusi pelle, polmoni, reni, cuore, testicoli e stomaco. FLCN è associata alla sindrome di Birt-Hogg-Dubé e agisce come soppressore tumorale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 341–579, situati nella regione C-terminale; pertanto, l'anticorpo può riconoscere la FLCN a lunghezza intera e potenzialmente alcune varianti di splicing.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 64 kDa; includere controlli positivi e negativi appropriati per confermare la specificità.
• Nell'IF/ICC, considerare condizioni di permeabilizzazione ottimizzate per i bersagli lisosomiali e citoplasmatici; la co-colorazione con marcatori degli organelli può aiutare a confermare la localizzazione.
• Per l'ELISA, la natura policlonale garantisce un'ampia copertura epitopica; titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• La reattività crociata è confermata per uomo, topo e ratto, ma si raccomanda la validazione nel proprio specifico sistema modello.

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