Anticorpo policlonale anti-FLT3 per WB, IHC-P, ELISA - P36888

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FLT3

• FLT3 (noto anche come CD135, FLK2, STK1, FLK-2) è una tirosina-chinasi proteica recettoriale che funge da recettore di superficie cellulare per la citochina FLT3LG.
• Gioca un ruolo critico nella regolazione della differenziazione, proliferazione e sopravvivenza delle cellule progenitrici ematopoietiche e delle cellule dendritiche.
• Al legame del ligando, FLT3 attiva molteplici vie di segnalazione a valle, inclusi RAS/MAPK, PI3K/AKT/mTOR e STAT5, fosforilando mediatori chiave come SHC1, AKT1 e PLCG1.
• FLT3 è espresso prevalentemente nel midollo osseo, nelle cellule staminali ematopoietiche, nelle cellule progenitrici mieloidi e nelle cellule progenitrici granulocitarie/macrofagiche, con livelli inferiori nel rene e nel pancreas e alta espressione nella leucemia a cellule T.
• È localizzato sulla membrana cellulare e nel lume del reticolo endoplasmatico, coerente con il suo ruolo di recettore transmembrana.
• Le parole chiave evidenziano il suo coinvolgimento come proto-oncogene, con mutazioni associate alla malattia che causano attività chinasica costitutiva collegata alla leucemia.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e ubiquitinazione, che regolano la sua stabilità e segnalazione.
• Lo splicing alternativo produce multiple isoforme, potenzialmente influenzando il legame del ligando e l'attività chinasica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide all'interno della regione intracellulare (amminoacidi 701-800) di FLT3 umano, che include parte del dominio della tirosina chinasi. Questa regione è altamente conservata, suggerendo una potenziale reattività crociata con FLT3 di topo e ratto come indicato dal fornitore.
• Per il Western blotting, è prevista una banda a circa 113 kDa. Ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo utilizzando lisati di controllo positivi appropriati (es. linee cellulari ematopoietiche).
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene e di rilevamento dovrebbero essere validate utilizzando sezioni tissutali note per esprimere FLT3, come campioni di midollo osseo o leucemia.
• Per l'ELISA, l'uso dell'immunogeno peptidico può migliorare la sensibilità; considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento contro un epitopo distinto per l'ELISA a sandwich.

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