Anticorpo Monoclonale Anti-Flt3/CD135 per FC, ELISA - P36888

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FLT3

• FLT3 (Fms-like tyrosine kinase 3), noto anche come CD135, FLK2, STK1, è una tirosin-proteina chinaso di tipo recettoriale che agisce come recettore di superficie cellulare per la citochina FLT3LG, svolgendo un ruolo centrale nella regolazione della differenziazione, proliferazione e sopravvivenza delle cellule progenitrici ematopoietiche e delle cellule dendritiche.
• Dopo il legame con il ligando, FLT3 attiva molteplici vie di segnalazione a valle, tra cui la fosforilazione di SHC1 e AKT1, l'attivazione di mTOR, la segnalazione RAS e le cascate MAPK/ERK, promuovendo così la crescita cellulare e inibendo l'apoptosi.
• FLT3 è un membro della famiglia delle tirosin chinaso recettoriali di classe III, caratterizzata da una regione extracellulare con cinque domini simili alle immunoglobuline, una singola elica transmembrana e un dominio chinaso intracellulare; lo splicing alternativo genera isoforme con proprietà distinte.
• Subcellularmente, FLT3 si localizza principalmente sulla membrana plasmatica, ed è rilevabile anche nel lume del reticolo endoplasmatico, coerentemente con la sua biosintesi e il traffico verso la membrana.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina, che regolano la sua attività, stabilità e output di segnalazione; le mutazioni che causano l'attivazione costitutiva sono associate alla leucemia mieloide acuta (LMA).
• L'espressione tissutale è prominente nel midollo osseo, in particolare nelle cellule staminali ematopoietiche, progenitori mieloidi e progenitori granulociti/macrofagi; è rilevabile anche in fegato, timo, milza, linfonodi, e a livelli più bassi in rene e pancreas, con alta espressione nella leucemia a cellule T.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre il dominio extracellulare N-terminale (amminoacidi 27–163), quindi questo anticorpo monoclonale può riconoscere l'epitopo extracellulare nativo, rendendolo potenzialmente adatto alla citometria a flusso (FC) per rilevare FLT3 sulla superficie cellulare.
• Per le applicazioni ELISA, è consigliabile abbinare questo anticorpo con un anticorpo di rilevazione validato per creare un ELISA sandwich sensibile; le concentrazioni di lavoro ottimali devono essere determinate sperimentalmente per ogni sistema di analisi.
• Data la glicosilazione di FLT3 e la sua potenziale dimerizzazione, il western blotting denaturante può richiedere un'attenta ottimizzazione; le varianti di peso molecolare (108 e 113 kDa) riflettono una glicosilazione differenziale o forme precursori.
• L'anticorpo è specifico per FLT3 umano; la reattività crociata con altre specie o con altre tirosin chinaso recettoriali deve essere verificata autonomamente nella matrice di campione corrispondente.

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