Anticorpo monoclonale Anti-FMRP per WB, IHC-P, ELISA - Q06787

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di FMRP

• FMRP (Fragile X messenger ribonucleoprotein 1), codificata dal gene FMR1, è una proteina legante l'RNA associata ai polisomi, multifunzionale e fondamentale per lo sviluppo neuronale e la plasticità sinaptica. Regola lo splicing alternativo dell'mRNA, la stabilità dell'mRNA, il trasporto dendritico e la sintesi proteica locale a livello delle sinapsi. Riferimenti correlati: PMID:12417522 PMID:16631377 PMID:18653529 PMID:30765518 PMID:31439799 PMID:11157796 PMID:11532944 PMID:12594214
• Agisce sia come repressore che come attivatore traslazionale degli mRNA target. Nelle sinapsi, di solito reprime la traduzione tramite il complesso CYFIP1-EIF4E-FMR1 e formando granuli ribonucleoproteici a separazione di fase che inibiscono la traduzione. Tuttavia, dopo la stimolazione del recettore metabotropico del glutammato (mGluR), può attivare la traduzione di un sottoinsieme di mRNA dendritici. Riferimenti correlati: PMID:12417522 PMID:31439799 PMID:30765518 PMID:11157796 PMID:11532944 PMID:12594214
• Si lega a specifici motivi RNA che includono le strutture G-quadruplex, le sequenze ricche di uridina e le sequenze consenso ACU[GU] e [AU]GGA, principalmente all'interno delle sequenze codificanti e delle 3'UTR degli mRNA target. Interagisce inoltre con l'RNA non codificante BC1 e diversi miRNA. Riferimenti correlati: PMID:23235829 PMID:11719189 PMID:18579868 PMID:25464849 PMID:12927206
• Si localizza ampiamente nel citoplasma, in particolare nelle proiezioni neuronali tra cui dendriti, assoni, spine dendritiche e coni di crescita. È presente nei granuli ribonucleoproteici, nei granuli da stress e nelle siti sinaptici (sia pre che postsinaptici). La localizzazione nucleare include il nucleolo, i corpi di Cajal e il centromero. È anche associato alla membrana cellulare.
• Post-traduzionalmente è modificato da acetilazione, metilazione e fosforilazione (inclusa la fosforilazione che promuove la separazione di fase). È stata rilevata anche l'ubiquitinazione. Le mutazioni in FMR1 causano la sindrome dell'X fragile (disabilità intellettiva) e l'insufficienza ovarica prematura; la proteina è implicata nella neurodegenerazione.
• Presenta un'espressione tessuto-specifica, principalmente nel cervello, cervelletto, testicolo e tessuti epiteliali. A livello proteico, è rilevata in neuroni, cellule di Purkinje, spermatogoni e linfociti.
• In vitro, FMRP si lega preferenzialmente agli omopolimeri di RNA poli(G) e poli(U). Riferimenti correlati: PMID:12950170 PMID:15381419 PMID:7688265 PMID:24204304

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre i residui 1–100 di FMRP umano (Q06787); pertanto, ci si aspetta che l'anticorpo riconosca la regione N-terminale. Per western blot (WB), è prevista una banda a ~71 kDa; si consiglia di utilizzare lisati di cervello o testicolo (con elevata espressione endogena) come controlli positivi.
• Per l'immunohistochimica (IHC-P), una colorazione ottimale può richiedere il recupero dell'antigene e un'attenta titolazione; si consiglia la validazione in tessuti neuronali di uomo, topo o ratto.
• In ELISA, il peptide immunogeno può essere utilizzato come standard per saggi quantitativi; abbinato a un anticorpo di rilevamento appropriato, questo clone può essere adatto per lo sviluppo di ELISA sandwich.
• Essendo un anticorpo monoclonale di coniglio, questo reagente garantisce una buona riproducibilità tra lotti e un'elevata affinità, ma ogni nuovo lotto deve essere validato nel sistema di saggio specifico dell'utente finale.

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