Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-FOXO1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q12778

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FOXO1

• FOXO1 (Forkhead box protein O1, noto anche come FKHR o FOXO1A) è un fattore di trascrizione della famiglia forkhead box, con un peso molecolare di circa 70 kDa (previsto 69.7 kDa).
• Agisce come bersaglio principale della segnalazione insulinica, regolando l'omeostasi metabolica in risposta allo stress ossidativo (PubMed:10358076, PubMed:12228231, PubMed:15220471). Riferimenti correlati: PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• FOXO1 si lega all'elemento di risposta all'insulina (IRE) e all'elemento di legame della famiglia Daf-16 (DBE) per modulare la trascrizione dei geni bersaglio, e la sua attività è soppressa dall'insulina (PubMed:10358076). Riferimenti correlati: PMID:10358076
• Le funzioni chiave includono la promozione della gluconeogenesi negli epatociti tramite cooperazione con PPARGC1A e CEBPA (PubMed:17024043), il controllo dell'equilibrio redox e della massa ossea, e la regolazione del numero di osteoblasti e del destino condrogenico (Per somiglianza). Riferimenti correlati: PMID:17024043
• FOXO1 è un importante regolatore della morte cellulare, promuovendo l'apoptosi nelle cellule neurali (PubMed:18356527), nelle cellule muscolari lisce cardiache (PubMed:19483080) e nella morte cellulare mediata da autofagia (PubMed:20543840). Riferimenti correlati: PMID:18356527 PMID:19483080 PMID:20543840
• La localizzazione subcellulare è dinamica: FOXO1 si sposta tra il citoplasma e il nucleo in risposta a modificazioni post-traduzionali come fosforilazione e acetilazione.
• È espresso abbondantemente nel muscolo scheletrico e nell'ovaio, con livelli inferiori nel cuore, placenta, polmone, fegato, pancreas, milza, testicolo e intestino tenue, e debole espressione nel cervello, timo, prostata e colon (PubMed:9479491). Riferimenti correlati: PMID:9479491
• FOXO1 è soggetto a multiple modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione, che modulano la sua attività trascrizionale e stabilità.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 340–580 all'interno della regione regolatoria C-terminale di FOXO1, che contiene siti critici di fosforilazione e acetilazione; pertanto, questo anticorpo può rilevare sia le forme totali che quelle modificate. Considerare la validazione con trattamento con fosfatasi o deacetilasi quando si valutano stati di modificazione specifici.
• Per il Western blot (WB), è attesa una banda a ~70 kDa; includere controlli positivi come lisati di HeLa, HepG2 o muscolo scheletrico, poiché FOXO1 è fortemente espresso in questi tessuti.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitoistochimica (IF/ICC), FOXO1 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, con traslocazione nucleare promossa da stress ossidativo o privazione sierica. Ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per preservare la localizzazione endogena.
• Per l'ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento che bersagli un epitopo distinto per migliorare la specificità; confermare le prestazioni utilizzando la proteina ricombinante FOXO1.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, può verificarsi variabilità tra lotto e lotto; per esperimenti critici è consigliata una validazione indipendente con knockdown mediato da siRNA o un peptide bloccante.

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