Anticorpo Policlonale Anti-FOXO3A per WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9WVH4

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di FOXO3A

• La proteina Forkhead box O3 (FOXO3A), nota anche come Fkhr2 o Foxo3a, è codificata dal gene Foxo3.
• FOXO3A è un attivatore trascrizionale che si lega alla sequenza di consenso del DNA 5'-[AG]TAAA[TC]A-3', regolando l'apoptosi e l'autofagia (PubMed:18054315, PubMed:18054316, PubMed:23805378). Riferimenti correlati: PMID:18054315 PMID:18054316 PMID:23805378
• Regola positivamente l'autofagia nel muscolo scheletrico attraverso defosforilazione, ingresso nucleare e attivazione di geni autofagici come GABARAP1L e MAP1LC3B, portando alla proteolisi (PubMed:18054315, PubMed:18054316, PubMed:25402684). Riferimenti correlati: PMID:18054315 PMID:18054316 PMID:25402684
• In risposta allo stress metabolico, FOXO3A si transloca nei mitocondri per promuovere la trascrizione del mtDNA (PubMed:23283301). Riferimenti correlati: PMID:23283301
• La proteina si sposta tra il citoplasma, il nucleo e i mitocondri (matrice e membrana esterna), con cambiamenti di localizzazione dipendenti dalle condizioni cellulari.
• L'espressione tissutale include i tessuti adiposi bianco e bruno, fegato, rene, polmone, colon e muscolo scheletrico (PubMed:22510882, PubMed:29445193). Riferimenti correlati: PMID:22510882 PMID:29445193
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione, metilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua attività e stabilità.
• Inoltre, FOXO3A partecipa alla regolazione post-trascrizionale di MYC tramite miR-34b/c, promuove l'impegno condrogenico dei progenitori scheletrici (PubMed:32103177) e guida la differenziazione delle cellule T regolatorie attivando FOXP3. Riferimenti correlati: PMID:32103177

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 371–470 del FOXO3A di topo; gli anticorpi policlonali risultanti possono riconoscere più epitopi, rendendoli adatti per il Western blot denaturante in cui gli epitopi linearizzati sono esposti.
• Per WB, prevedere una banda a circa 71 kDa; tuttavia, la fosforilazione e altre modifiche possono spostare o creare bande aggiuntive, quindi convalidare con controlli appropriati e inibitori della fosfatasi se necessario.
• Per IF/ICC e IF-P, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per garantire l'accesso dell'anticorpo ai compartimenti nucleari e citoplasmatici dove si localizza FOXO3A.
• Per ELISA, questo anticorpo può essere considerato come reagente di cattura o di rilevamento, ma gli utenti dovrebbero eseguire titrazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.
• La reattività incrociata è stata confermata con topo e ratto; le reazioni con altre specie devono essere verificate sperimentalmente.

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