Anticorpo monoclonale anti-FOXP1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H334

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di FOXP1

• FOXP1, membro della famiglia forkhead box, agisce principalmente come repressore trascrizionale. Reprime direttamente il promotore di CSF1R tramite il corepressore NCOR2 e modula la differenziazione di monociti/macrofagi (PubMed:15286807, PubMed:18347093, PubMed:18799727). Riferimenti correlati: PMID:15286807 PMID:18347093 PMID:18799727
• Nelle cellule B, FOXP1 coopera con la segnalazione di NF-κB per inibire l'apoptosi dipendente dalle caspasi, promuovendo l'espansione cellulare. Regola inoltre negativamente la differenziazione delle cellule T helper follicolari (PubMed:25267198). Riferimenti correlati: PMID:25267198
• FOXP1 è fondamentale per lo sviluppo dell'epitelio polmonare, limitando il destino delle cellule caliciformi in cooperazione con FOXP4, e per la proliferazione delle cellule del muscolo cardiaco.
• Dirige l'organizzazione colonnare dei motoneuroni spinali, contribuendo alla formazione di LMC e PGC e alla guida assonale, in collaborazione con le proteine Hox.
• Localizzato nel nucleo, FOXP1 subisce fosforilazione e ubiquitinazione e si lega al DNA tramite il suo dominio forkhead a dita di zinco. È coinvolto in diverse patologie e riarrangiamenti cromosomici.
• Nell'angiogenesi, FOXP1 sopprime SEMA5B per regolare il comportamento delle cellule endoteliali (PubMed:24023716). Regola inoltre negativamente la segnalazione del recettore degli androgeni (PubMed:18640093) e attiva la trascrizione di FBXL7 sotto il controllo di AURKA (PubMed:28218735). Riferimenti correlati: PMID:24023716 PMID:18640093 PMID:28218735
• L'isoforma 8 specifica delle ESC mantiene la pluripotenza stimolando i geni della pluripotenza e legandosi a distinti motivi del DNA (PubMed:21924763). Riferimenti correlati: PMID:21924763

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), l'anticorpo rileva una banda di circa 75 kDa. Utilizzare lisati cellulari totali di linee cellulari B (ad es. Ramos, Daudi) o tessuti ricchi di FOXP1 (milza, polmone) come controlli positivi. Se disponibili, validare con campioni sottoposti a knockdown.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), si raccomanda il recupero antigenico con tampone citrato (pH 6,0). Eseguire il test su sezioni di tonsilla o milza umana fissate in formalina e incluse in paraffina, nelle quali è prevista una colorazione nucleare.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), permeabilizzare le cellule con Triton X-100 allo 0,1% e attendersi una localizzazione nucleare. Eseguire una co-colorazione con un marcatore nucleare (ad es. DAPI) per la conferma.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo dell'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione in un ELISA sandwich; abbinarlo a un clone diverso o a un anticorpo policlonale anti-FOXP1 per ottenere una sensibilità ottimale.
• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 550-677, situati a valle del dominio forkhead, e può riconoscere più isoforme. Verificare la specificità per l'isoforma nel proprio sistema utilizzando controlli specifici per isoforma.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con FOXP1 di topo e di ratto, rendendolo adatto agli studi sui roditori. Tuttavia, confermare la reattività nei propri tessuti o nelle proprie linee cellulari prima di eseguire saggi quantitativi.

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