Anticorpo Monoclonale Anti-FPGS per WB, ELISA - Q05932

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della FPGS

• FPGS (Folilpoliglutamato sintasi) è un enzima mitocondriale che catalizza l'aggiunta dipendente da ATP di residui di glutammato al folato e ai suoi derivati, convertendoli in forme poliglutamate.
• Questa poliglutamazione consente la ritenzione cellulare dei folati, poiché i poliglutamati sono scarsamente trasportati attraverso le membrane, e aumenta la loro affinità per gli enzimi dipendenti dal folato.
• FPGS è centrale nel metabolismo a un carbonio, fornendo substrati essenziali per la biosintesi di purine, pirimidine e aminoacidi.
• L'enzima metabolizza anche il farmaco antifolato metotrexato (MTX) in derivati poliglutamato, influenzando la ritenzione intracellulare del farmaco e l'attività farmacologica.
• L'inizio alternativo e lo splicing generano multiple isoforme; l'isoforma primaria contiene un peptide di transito mitocondriale e si localizza alla membrana interna e alla matrice mitocondriale, mentre è stata osservata anche la localizzazione citoplasmatica.
• FPGS richiede magnesio come cofattore e ATP per la catalisi; le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua attività.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (aa 450–587) di FPGS umano, il che può aiutare a rilevare isoforme specifiche o evitare il mascheramento dell'epitopo nel dominio catalitico.
• In WB, il precursore mitocondriale a lunghezza intera è previsto a ~65 kDa; validare la banda osservata nel sistema di lisati cellulari o tissutali.
• La reattività crociata è confermata per umano e ratto; per altre specie, verificare l'omologia di sequenza della regione immunogenica prima dell'uso.
• Per ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo di cattura o l'uso di standard FPGS ricombinante per ottimizzare la sensibilità dell'analisi.

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