Anticorpo monoclonale anti-FXR1 per WB, IP, IF/ICC, ELISA - P51114

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di FXR1

• FXR1, un omologo autosomico della proteina della sindrome dell'X fragile FMR1, è una proteina legante l'mRNA che regola la traduzione e la stabilità dei trascritti bersaglio, svolgendo ruoli essenziali nella neurogenesi, nello sviluppo muscolare e nella spermatogenesi. Riferimenti correlati: PMID:17382880, PMID:20417602, PMID:30067974
• Riconosce specificamente gli elementi ricchi in AU (ARE) nelle 3'-UTR degli mRNA, come MYC, e può reclutare il complesso eIF4F per potenziare l'inizio della traduzione. Riferimenti correlati: PMID:17382880, PMID:34731628
• Attraverso la separazione di fase liquido-liquido, FXR1 assembla l'mRNA in granuli ribonucleoproteici citoplasmatici, un processo fondamentale per l'attivazione della traduzione degli mRNA immagazzinati negli spermatidi tardivi e per lo sviluppo del tessuto muscolare.
• FXR1 si localizza nel citoplasma, nei granuli di stress, nei dendriti, nelle spine dendritiche e negli assoni, e presenta livelli elevati di proteina nei neuroni, soprattutto nelle cellule di Purkinje cerebellari. Riferimenti correlati: PMID:7781595, PMID:9259278
• Agisce come regolatore negativo dell'infiammazione legandosi ai trascritti pro-infiammatori e destabilizzandoli, incluso l'mRNA del TNF, limitando così le risposte immunitarie eccessive. Riferimenti correlati: PMID:30067974
• FXR1 previene la separazione di fase ectopica e l'aggregazione citoplasmatica delle nucleoporine, garantendo la corretta localizzazione del complesso del poro nucleare, e funge inoltre da impalcatura per una rete mRNP citoplasmatica che facilita la segnalazione correlata all'actomiosina. Riferimenti correlati: PMID:32706158, PMID:39106863

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo monoclonale di coniglio è stato prodotto contro la regione N-terminale (aa 1-100) della FXR1 umana; se si lavora con specie o isoforme diverse da quelle validate, ovvero essere umano, topo e ratto, è consigliabile verificare la conservazione dell'epitopo.
• Nel western blot, la banda predominante dovrebbe comparire intorno a 70 kDa, ma lo splicing alternativo può produrre isoforme aggiuntive; validare il risultato utilizzando controlli positivi e negativi appropriati nel proprio sistema campione.
• Per l'immunoprecipitazione, FXR1 forma complessi ribonucleoproteici; utilizzare condizioni prive di RNasi e controlli appropriati per distinguere le interazioni dirette da quelle indirette.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, FXR1 può accumularsi nei granuli citoplasmatici e nelle proiezioni neuronali; ottimizzare la fissazione/permeabilizzazione e considerare la co-colorazione con marcatori dei granuli, come G3BP1 per i granuli di stress.
• La reattività crociata dell'anticorpo con topo e ratto consente studi traslazionali tra specie; tuttavia, è necessario confermare la reattività nel tessuto o nel tipo cellulare specifico di interesse.
• Data la sua funzione di legame all'RNA, evitare la contaminazione da RNasi durante la preparazione dei campioni e la colorazione, al fine di preservare i complessi FXR1-mRNA e l'accessibilità dell'epitopo.

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