Anticorpo monoclonale di coniglio anti-G3BP1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13283

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di G3BP1

• La proteina 1 legante l'attivatore GTPasico Ras (G3BP1), anche designata come elicasi del DNA ATP-dipendente VIII (hDH VIII) e proteina 1 legante il dominio SH3 di GAP, è una proteina multifunzionale coinvolta nella dinamica dei granuli di stress, nel metabolismo dell'RNA e nell'immunità innata.
• G3BP1 è un nucleatore critico dei granuli di stress, organelli privi di membrana che sequestrano mRNA e complessi di traduzione bloccati sotto stress. Guida la separazione di fase liquido-liquido (LLPS) legando RNA non ripiegato, fungendo da interruttore molecolare che rileva i livelli di RNA libero per innescare la condensazione.
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• Presenta attività elicasica ATP- e magnesio-dipendente, svolgendo duplici DNA/DNA, RNA/DNA e RNA/RNA con direzionalità 5'→3', preferendo duplici parziali con una regione appaiata di 17 bp e sporgenze 3'.
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  PMID:9889278
• Potenzia la segnalazione immunitaria innata promuovendo la via di rilevamento del DNA cGAS-STING e la via di rilevamento dell'RNA RIG-I. Facilita il legame del DNA e la condensazione di cGAS e aumenta la produzione di interferone di tipo I mediata da RIG-I.
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  PMID:30510222 PMID:30804210 PMID:34779554
• Possiede attività endoribonucleasica dipendente dalla fosforilazione in vitro, clivando tra citosina e adenina con una preferenza per la regione 3'-UTR dell'mRNA di MYC.
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  PMID:11604510
• Si localizza nel citoplasma, citosol, perikarion, nucleo e, in modo prominente, nei granuli di stress in seguito a insulto cellulare.
• Esprime in modo ubiquitario nei tessuti ed è soggetta a molteplici modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e coniugazione simil-ubiquitina, che possono regolarne la funzione e la localizzazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 350-450 di G3BP1 umano (Q13283), una regione all'interno del dominio C-terminale. Questa sequenza è altamente conservata tra umano, topo e ratto, supportando la reattività crociata riportata.
• Per il Western blot (WB), è attesa una banda specifica a circa 52 kDa. Ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo per il tipo di campione.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), G3BP1 mostra una colorazione citoplasmatica diffusa in condizioni basali; potrebbe essere necessaria l'induzione dei granuli di stress (ad es. mediante trattamento con arsenito) per osservare una localizzazione punteggiata distinta.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), confermare l'efficienza di cattura nelle condizioni di lisi e lavaggio, poiché le interazioni di G3BP1 con RNA e altre proteine possono influenzare il recupero.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; validare l'abbinamento con un anticorpo secondario compatibile o l'antigene.
• Convalidare sempre le prestazioni dell'anticorpo nel sistema di campione e nell'applicazione rilevanti, poiché le condizioni sperimentali possono influenzare i risultati.

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