Anticorpo policlonale coniglio anti-GABARAPL1 per WB, ELISA - Q9H0R8

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di GABARAPL1

• GABARAPL1 è una proteina modificatrice simile all'ubiquitina appartenente alla sottofamiglia GABARAP/GATE-16, distinta dai membri della famiglia LC3, con ruoli nell'autofagia e nel traffico dei recettori.
• Facilita il traffico intracellulare anterogrado del recettore oppioide di tipo kappa, aumentando la sua espressione sulla superficie cellulare.
  Riferimenti correlati: PMID:16431922
• Essenziale per la maturazione dell'autofagosoma: mentre le LC3 mediano l'allungamento del forofago, GABARAPL1 funziona in una fase successiva per completare la formazione dell'autofagosoma.
  Riferimenti correlati: PMID:20404487
• Partecipa alla reticulofagia: attraverso l'interazione con il recettore TEX264, rimodella i sottodomini del reticolo endoplasmatico in autofagosomi per il turnover del RE in condizioni di stress nutrizionale.
  Riferimenti correlati: PMID:31006537 PMID:31006538
• A livello subcellulare, si localizza agli autofagosomi, alle membrane autofagosomiali, al citoplasma, al citoscheletro (microtubuli), al reticolo endoplasmatico e all'apparato di Golgi.
• È espresso ubiquitariamente ma a livelli molto alti nel cervello, cuore, leucociti del sangue periferico, fegato, rene, placenta e muscolo scheletrico; notevolmente intenso nei motoneuroni del cervello e nella substantia nigra pars compacta.
• La proteina subisce splicing alternativo ed è annotata con parole chiave relative alla lipidazione (lipoproteina), interazione ospite-virus e proteoma di riferimento.
• Il suo peso molecolare calcolato è di ~14 kDa, coerente con la banda riportata di 14 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre la regione N-terminale (aa 1-50); questo design potrebbe consentire il rilevamento della GABARAPL1 a lunghezza intera e potenzialmente di alcune varianti di splicing.
• Per il Western blot, considerare l'esecuzione di lisati cellulari totali da tessuti cerebrali o cardiaci, dove l'espressione è elevata; ci si aspetta una banda vicino a 14 kDa.
• ELISA può essere eseguita utilizzando il peptide immunizzante come controllo positivo; titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Questo anticorpo potrebbe essere adatto per monitorare il flusso autofagico; abbinato agli inibitori dell'autofagia (es. clorochina), è possibile osservare cambiamenti nella lipidazione di GABARAPL1 o nella formazione di puntini.
• Quando si esegue l'immunofluorescenza per GABARAPL1, notare la sua associazione con le membrane autofagosomiali e del RE; le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate.
• È riportata la reattività crociata con topo e ratto; verificare la reattività nel vostro specifico sistema di campione, poiché le modifiche post-traduzionali o le differenze di specie possono influenzare il legame.

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