Anticorpo policlonale anti-GABARAPL2 per WB, ELISA - P60520

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di GABARAPL2

• GABARAPL2 (proteina 2 simile alla proteina associata al recettore dell'acido gamma-amminobutirrico) è nota anche come GATE-16, GEF-2, ATG8C e proteina correlata alla catena leggera 3 di MAP1. Appartiene alla sottofamiglia GABARAP/GATE-16 delle proteine simili all'ubiquitina.
• Funziona come modificatore simile all'ubiquitina coinvolto nel trasporto intra-Golgi, modulando l'accoppiamento tra l'attività ATPasica di NSF e l'attivazione degli SNARE (per similitudine).
• GABARAPL2 svolge un ruolo critico nell'autofagia, in particolare nella maturazione degli autofagosomi, distinguendosi dalle proteine LC3 coinvolte nell'allungamento dei fagofori. È inoltre coinvolta nella mitofagia, contribuendo al mantenimento della qualità mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:20418806, PMID:23209295
• A livello subcellulare, è localizzata nelle vescicole citoplasmatiche, negli autofagosomi, nella membrana del reticolo endoplasmatico e nell'apparato di Golgi.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, indicando la presenza di meccanismi regolatori.
• La proteina è espressa ubiquitariamente, con livelli elevati nel cervello, nel cuore, nella prostata, nelle ovaie, nella milza e nel muscolo scheletrico, e livelli bassi nei polmoni, nel timo e nell'intestino tenue.
• Le parole chiave di UniProt evidenziano il suo coinvolgimento nell'autofagia, nel trasporto delle proteine, nell'associazione alle membrane e nel proteoma di riferimento.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali ottenuti da linee cellulari umane o murine che si prevede esprimano GABARAPL2, ad esempio quelle derivate da tessuti cerebrali, cardiaci o prostatici, considerata l'elevata espressione in questi tessuti.
• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-50), che può essere adatta per rilevare sia le forme a lunghezza completa sia quelle processate; validare nel proprio sistema sperimentale.
• Per l'ELISA, testare GABARAPL2 ricombinante o il peptide per stabilire le condizioni del saggio; è necessario valutare la reattività crociata con altri membri della famiglia (ad es. GABARAP, LC3).
• Poiché GABARAPL2 è coinvolta nell'autofagia, si può prendere in considerazione il trattamento delle cellule con induttori dell'autofagia (ad es. digiuno, rapamicina) per aumentare il segnale qualora i livelli endogeni siano bassi.
• Essendo un anticorpo policlonale, può presentare variabilità tra diversi lotti; ottimizzare le diluizioni e confermare la specificità mediante controlli knockout o knockdown.

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